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研晶科研試劑供應網-抗體試劑網
閱讀:1165發布時間:2014-3-27
碘[125I]胃泌素*說明書
【藥品名稱】
通用名稱:碘[125I]胃泌素*
英文名稱:Iodine[125I]Gastrin Radioimmunoassay Kit
漢語拼音:Dian [125I]Weimisu Fangshemianyifenxi Yaohe
【成分】
規格 成分 | 100管 | 50管 | 制品狀態 |
Gas.標準品(S1~S5) | 5瓶 | 5瓶 | 凍干品 |
125I-Gas.(紅色) | 2瓶 | 1瓶 | 凍干品 |
兔抗-Gas.抗體(藍色) | 1瓶 | 1瓶 | 凍干品 |
驢抗兔免疫分離劑 | 1瓶/50ml | 1瓶/25ml | 液 體 |
Gas.EDTA溶液 | 1瓶/10ml | 1瓶/10ml | 液 體 |
Gas.緩沖液 | 1瓶/40ml | 1瓶/40ml | 液 體 |
Gas.質控 | 2瓶 | 2瓶 | 凍干品 |
【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應澄清,無沉淀或絮狀物;凍干組分應成疏松狀,復溶后應無沉淀或絮狀物。
【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I],其物理半衰期(T½)為60天。
【臨床意義】
胃泌素(Gastrin,簡稱Gas.)是胃竇和十二指腸G細胞分泌的一種消化道激素,具有促進胃酸分泌。胃竇收縮及營養胃腸道粘膜等生理功能。在某些疾病中胃泌素的分泌可出現異常。如:胃泌素瘤,惡性貧血。胃酸缺乏和一些消化性潰瘍病等,血清中胃泌素濃度增高。說明胃泌素在機體正常和病理情況下都有重要作用,由于胃泌素在血液中含量甚微,只有用放射免疫測定法才能靈敏準確的測定出來,因此建立胃泌素放射免疫分析測定對消化道系統生理病理的基礎理論研究和臨床診斷都有重要的意義。
【測定原理】
采用競爭機制原理,標準或樣品中的Gas.和加入的125I-Gas.共同與一定量的特異性抗體產生競爭性免疫反應。125I-Gas.與抗體的結合量與標準或樣品中Gas.的含量呈一定的函數關系。用免疫分離劑(PR)將結合部分(B)與游離部分(F)分離后,測定結合部分的放射性強度,并計算相應結合率B/B0。用已知標準Gas.含量與對應結合率作圖,即得標準抑制曲線。從標準曲線上查知對應結合率的待測樣品中Gas.的含量。
【適用儀器】適用于各類γ-*。
【樣本要求】
取靜脈血分離血清,待測;血漿則需加入抗凝劑,混勻,分離血漿后,待測;如不立即測量,可將樣品密封后,置于-20℃儲存備測,保存期不超過一個月;若分離血清后5小時內測量,可將樣品2~8℃保存。冰凍樣品在保存過程中應避免反復凍融。冰凍樣品測定前,將樣品置于室溫或常溫水中融化,并充分搖勻。
【用法用量】
1 試劑配制、使用方法和保存
(1)Gas.標準品:凍干品,向每瓶標準品中準確地加入1ml緩沖液溶解。溶解15分鐘后搖勻方可使用。溶解后各標準濃度值分別為25,60,150,400,1000pg/ml。標準復溶后2~8℃保存可穩定42天,凍干品-20℃保存標識的有效期內穩定。
(2)125I-Gas.:凍干品,每瓶用5ml緩沖液溶解。若加樣超過50管,兩瓶溶解后混合使用;若低于50管,可先溶一瓶,用完后再溶一瓶。50管標記物放射性不大于55 KBq(1.5μCi)。
(3)兔抗-Gas.抗體:凍干品,用緩沖液溶解,100管產品每瓶抗體加10ml,50管產品抗體每瓶加5ml。同次實驗抗體加樣超過100管時,兩瓶溶解后混合使用。抗體溶解后2~8℃保存可穩定42天,凍干品-20℃保存有效期內穩定。
(4)驢抗兔免疫分離劑:液體,加樣前必須搖勻!2~8℃保存,有效期內穩定。開封后42天內穩定。若加樣超過100管,兩瓶混合后搖勻。
(5)Gas.EDTA溶液:液體,直接使用,2~8℃保存標識的有效期內穩定。加樣前必須搖勻!
(6)Gas.緩沖液:液體,直接使用,2~8℃保存,有效期內穩定。加樣前必須搖勻!
(7)Gas.質控:使用方法、保存條件、有效期及附值,詳見質控使用說明書。
2 測定步驟
取圓底聚苯乙烯試管若干,用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S0~S5和待測樣品管等,然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑(尤其分離劑!)包括待測樣品要搖勻,并且平衡到室溫。
加樣程序表 單位:μl
管別 試劑 | NSB管 | S0管 | S1~S5管 | 質控或待 |
Gas.緩沖液 | 200 | 100 | — | — |
Gas.EDTA溶液 | 100 | 100 | 100 | 100 |
Gas.標準品(S1~S5) | — | — | 100 | — |
質控或待測樣品 | — | — | — | 100 |
125I-Gas. | 100 | 100 | 100 | 100 |
兔抗-Gas.抗體 | — | 100 | 100 | 100 |
混勻,4℃溫育22~26小時,任取三管測放射性計數,求平均值為總T。 | ||||
驢抗兔免疫分離劑 | 500 | 500 | 500 | 500 |
充分搖勻,4℃放置15分鐘,3500轉/分鐘離心15分鐘,吸棄上清,測各沉淀管的放射性計數(cpm)。 |
3 數據處理
(1) 聯機處理:由電腦自動處理得出結果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同,處理軟件也不一樣,用戶一定要使用適合的處理軟件進行數據處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數數據處理模式。
(2) 手工作圖或計算器處理:
1). 百分結合率計算:設S0管計數為B0,各標準管或樣品管計數為B,非特異管計數為NSB,則百分結合率計算公式為:B/ B0=(B-NSB)/( B0-NSB)×100%
2). logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式為:logit=ln[(B/ B0)/(1-B/ B0)]
3). 手工作圖:以標準濃度取log值為橫坐標,對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標,對應的B/B0為縱坐標在log-logit坐標紙上畫出標準曲線(理想化時是一條直線)。根據待測樣品的B/B0可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意:如果使用普通坐標紙,查出的數值應取反對數才是zui后的濃度值。
4). 計算器處理:使用有線性擬合功能的計算器,可以比較方便地計算出樣品濃度值,具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。
標準曲線舉例(僅供參考,不得用于實際計算)。 濃度單位:pg/ml
項目 | NSB | 0 | 25 | 60 | 150 | 400 | 1000 |
百分結合率(%) | B/T | B/B0 | |||||
2.2 | 40 | 90 | 78 | 60 | 37 | 20 | |
log-logit 主要曲線參數 | A=5.24 B=-2.22 R=-0.999 ED75=58.2 ED50=229.4 ED25=716.1 |
【參考正常值】
空腹血清胃泌素參考正常值:67.3±39.2pg/ml。
由于地區及使用儀器不同,所測的正常值會存在一定的差異,所以本說明書提供的正常值僅作參考,各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。
【產品性能指標】
【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項】
【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外科研實驗用,兒童不需接觸本品,所以對其健康無損害。
【貯藏】2~8℃保存。
【有效期】1個月。
商鋪:http://www.cmr6829.com/st132832/
主營產品:流式標記抗體,FITC,PE,CY3,5,7標記ELISA試劑盒、生化檢測試劑盒、金標檢測試劑盒、分子生物學試劑盒、進口國產胎牛血清、生物抗體、細胞,試劑耗材
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