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C肽*說明書

閱讀：582發布時間：2013-06-21

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碘[¹²⁵I]C肽*說明書

【藥品名稱】

通用名稱：碘[¹²⁵I]C肽*

英文名稱：Iodine[¹²⁵I]C-peptide Radioimmunoassay Kit

漢語拼音：Dian [¹²⁵I] C-tai Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

規格成分	100管	50管	制品狀態
C-P標準品（A～F）	6瓶	6瓶	凍干品
¹²⁵I-C-P（紅色）	2瓶	1瓶	凍干品
C-P緩沖液	1瓶/40ml	1瓶/40ml	液體
兔抗-C-P抗體（藍色）	1瓶	1瓶	凍干品
驢抗兔免疫分離劑	1瓶/50ml	1瓶/25ml	液體
C-P質控血清	1套	1套	凍干品

【性狀】液體組分（免疫分離劑除外）應澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應成疏松狀，復溶后應無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I]，其物理半衰期（T½）為60天。

【臨床意義】

C肽（C-Peptide,C-P）是由31個氨基酸組成的直鏈多肽，分子量3021。由胰島素原在轉化酶的作用下，生成等克分子的C-肽和胰島素。由于C肽和胰島素以等摩爾的比例從胰島素細胞釋放至血液，因此測定血清C-肽可以反映胰島β細胞功能；此外，由于胰島素抗體和C-肽沒有交叉反映，而藥用胰島素中不含C肽，所以外源性胰島素不影響C肽的放免測定。因此，測定血清C肽對于接受胰島素治療的物種更能地判斷β細胞的分泌功能。而且對于糖尿病的分型，治療和預后估計以及對于糖代謝有關疾病的研究具有十分重要的意義。

本藥盒主要用于測定血清C-P含量。

【測定原理】

本方法采用競爭放射免疫分析法，即標準或待測樣品中的C-P和¹²⁵I-C-P共同與*的特異性C-P抗體在適宜的條件下進行競爭性結合反應。一部分¹²⁵I-C-P與抗體結合形成復合物，而另一部分呈游離狀態。¹²⁵I-C-P與抗體結合的比例取決于標準或待測樣品中非標記C-P的含量，非標記C-P的含量越高，¹²⁵I-C-P與抗體形成復合物越少，非標記C-P的含量越低，¹²⁵I-C-P與抗體形成復合物越多。抗原-抗體復合物用免疫分離劑沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數。經過適當的數據處理后可獲得標準曲線，從標準上查出被測樣品的C-P含量（數據可由計算機自動處理）。

【適用儀器】適用于各類γ-*。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣品密封后，置于-20℃儲存備測，-20℃保存不超過一個月。冰凍樣品在保存過程中應避免反復凍融。冰凍樣品測定前，講樣品置于室溫或常溫水中融化，并充分搖勻。

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

（1）C-P標準品：凍干品，向每瓶標準品中準確地加入1ml緩沖液溶解。溶解后搖勻方可適用。溶解后各標準濃度值分別為0.25,0.5,1.0,3.0,6.0,12.0ng/ml。標準復溶后在-20℃保存可穩定42天，凍干品-20℃保存有效期內穩定。

（2）¹²⁵I-C-P：凍干品，用緩沖液溶解，每瓶加5ml，加樣前搖勻。每瓶標記物放射性不大于74KBq（2μCi），沒用完的標記物-20℃保存可穩定42天。

（3）兔抗-C-P抗體：凍干品，用緩沖液溶解，每瓶抗體加＿ml（如不填寫100T加10ml,50T加5ml緩沖液溶解）。抗體溶解后2～8℃保存可穩定42天，凍干品-20℃保存有效期內穩定。

（4）驢抗兔免疫分離試劑：液體，加樣前必須搖勻！2～8℃保存，有效期內穩定。開封后45天內穩定。

（5）C-P緩沖液：液體，2～8℃保存，有效期內穩定。

（6）C-P質控血清：凍干品，使用前向每瓶質控血清中準確加入0.5ml蒸餾水溶解。復溶后-20℃保存可穩定42天，凍干品-20℃保存有效期內穩定。有效期及附值，詳見質控血清適用說明書。

2 測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S₀～S₆和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑！）包括待測樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

加樣程序表單位：μl

管別試劑	總T	NSB	S₀	S₁～S₅	待測樣品
C-P緩沖液	—	200	100	—	—
C-P標準品（A～F）	—	—	—	100	—
質控或待測樣品	—	—	—	—	100
兔抗-C-P 抗體	—	—	100	100	100
¹²⁵I-C-P	100	100	100	100	100
混勻，2～8℃溫育20～24小時。
驢抗兔免疫分離劑	—	500	500	500	500
充分搖勻，室溫放置15分鐘，3500轉/分鐘離心15分鐘，吸棄上清，測各沉淀管的放射性計數（cpm）。

3 數據處理

（1）聯機處理：由電腦自動處理得出結果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進行數據處理。在此建議用戶使用logit-log或四參數數據處理模式。

（2）手工作圖或計算器處理：

1）. 百分結合率計算：設S₀管計數為B₀，各標準管或樣品管計數為B，非特異管計數為NSB，則百分結合率計算公式為：B/ B₀=（B－NSB）/（ B₀－NSB）×100%

2）. logit計算:各標準點或樣品管的logit值計算公式為： logit=ln（B/ B₀）/（1－B/ B₀）

3）. 手工作圖：以標準濃度取log值為橫坐標，對應的logit值為縱坐標在普通坐標紙上或以標準濃度為橫坐標，對應的B/B₀為縱坐標在logit-log坐標紙上畫出標準曲線（理想化時是一條直線）。根據待測樣品的B/B₀可以從坐標紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標紙，查出的數值應取反對數才是zui后的濃度值。

4）. 計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

標準曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。

項目	NSB	0	A	B	C	D	E	F
濃度值（ng/ml）		0	0.25	0.5	1	3	6	12
百分結合率（%）	B/T	B/B₀
百分結合率（%）	1.5	40	87	70	57	29	19	10
logit-log 主要曲線參數	A=0.27 B=-2.16 R=-0.9995 ED75=0.41 ED50=1.33 ED25=4.29

【參考正常值】

空腹血清C-P參考正常值：平均值1.6ng/ml，范圍0.6～3.4 ng/ml。

餐后血清C-P峰值約為空腹時的5倍，峰值一般出現在餐后30～60分鐘（與進食食品種類有一定關系），3小時后接近空腹值。

單位換算：1ng/ml=100ng/dl=1000ng/l=1μg/l=0.331nmol/l

由于地區及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考，各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產品性能指標】

1. 測定范圍：0.25～12ng/ml

2. 靈敏度：0.1 ng/ml

3. 精密度：批內變異系數（CV）<10%；批間變異系數（CV）<15%。

4. 使用期限：見產品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用！

【注意事項】

1. 收到試劑盒后，盡快存放在2～8℃。

2. 使用前請詳細閱讀此說明書。

3. 由于標準品和標記物溶解后易失活，溶解后應及時保存在-20℃條件下，必要時分成若干份-20℃保存。

4. 不同藥盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。

5. 吸棄上清液時，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結果。

6. 當樣品中C-P濃度高于F點濃度時，可將樣品用緩沖液稀釋5-10倍后復測，測定濃度乘以稀釋倍數即為樣品的濃度。

7. 藥盒請在有效期內使用。

8. 臨床標本均應視為有潛在傳染性，請按傳染病實驗室規程操作。

9. 使用本藥盒應注意放射防護，放射性廢棄物須按放射防護條例規定處理。

10.使用本品的操作人員應經過專業技術培訓。

【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對其健康無損害。

【貯藏】2～8℃保存，其中¹²⁵I-C-P及C-P標準品溶解后-20℃保存。

【有效期】1個月。

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