弓形蟲抗體ELISA試劑盒
利用酶聯免疫間接法原理（ELISA）定性檢測人血清中的弓形蟲IgG抗體，適用于弓形蟲感染的輔助診斷。
使用方法：
取出試劑盒置室溫平衡30分鐘。將20×洗滌液用蒸餾水做20倍稀釋。加樣品：將待檢血清做1：10稀釋（取100μl標本稀釋液加入反應板孔內，再加10μl待檢血清）混勻，同時預留陰、陽性及空白對照共5孔。加入陰性對照3孔，陽性對照1孔，各100μl對照血清?？瞻讓φ?孔空置。將反應板輕輕震蕩使樣品混勻。溫育：用封板膜封板后，置37℃溫箱或水浴中反應30分鐘。洗板：溫育后，將封板膜揭掉，吸干孔內液體，用洗滌液洗板5次，每次浸泡30-60秒鐘。
加酶標工作液：每孔加入100μl酶標工作液，空白孔除外。溫育：用封板膜封板后，置37℃溫箱或水浴中反應30分鐘。洗板：溫育后，將封板膜揭掉，吸干孔內液體，用洗滌液洗板5次，每次浸泡30-60秒鐘。顯色：每孔加底物A、B液各50μl，輕輕震蕩混勻，用封板膜封板后，置37℃溫箱或水浴中反應10分鐘。
終止：每孔加入終止液50μl，輕輕震蕩混勻。測定：設定酶標儀波長于450nm（建議雙波長450/630nm檢測），測定各孔A450值。注意：在終止反應30分鐘內讀數。當使用單波長時，校準空白孔，設定酶標儀波長于450nm，測定各孔A450值，當使用雙波長450/630nm檢測時，可以不設空白孔，測定各孔A值。
組份名稱 規格及數量(48T) 規格及數量(96T)
TOX -Ag包被板 1塊（48孔） 1塊（96孔）
陽性對照 1支0.5ml 1支0.5ml
陰性對照 1支0.5ml 1支0.5ml
標本稀釋液 1瓶6ml 1瓶12ml
酶標工作液 1瓶6ml 1瓶12ml
濃縮洗滌液（20×） 1瓶30ml 1瓶50ml
底物A液 1瓶3ml 1瓶6ml
底物B液 1瓶3ml 1瓶6ml
終止液 1瓶3ml 1瓶6ml
自封袋 1個 1個
封板膜 3張 3張
標本采集、保存和運輸
1.適用標本類型：血清或血漿。血清中的內源性干擾物如血脂、膽紅素、血紅蛋白在通常情況下不會影響實驗結果。RF因子陽性、孕婦、AFP陽性標本不影響實驗結果，HAV、HCV、乙肝等相關疾病抗體陽性標本通常情況下不影響實驗結果。
2.標本采集：
2.1 血清：用一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血2ml，注入一5ml無菌的干燥玻璃管中(或含有促凝劑)，室溫放置30min，2,000rpm離心3min，吸取上層血清，轉移至一潔凈的1.5ml離心管中，密閉送檢。血清樣本中混濁或有沉淀的樣本應先離心或過濾后取澄清的液體進行檢測，如果未充分沉淀，懸浮的纖維蛋白可能引起假陽性。
2.2 血漿：用一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血2ml，注入一5ml無菌的含有Na2EDTA或枸櫞酸鈉抗凝劑的玻璃管中立即輕輕顛倒玻璃管混勻5-10次以充分混勻，室溫放置30min，2,000rpm離心3min，吸取上層血漿，轉移至一潔凈的1.5ml離心管中，密閉送檢。標本中含有EDTA、檸檬酸鈉、肝素鈉等抗凝劑時，不影響結果。
3.保存和運輸：標本儲存在2~8℃，一周內不需要檢測的標本應儲存在-20℃以下低溫冷凍保存，需長期保存的標本存于-70℃冰箱，避免反復凍融。血清的運送應在2~8℃條件下由專人運送，由專人打開樣本的包裝，記錄相關信息，核對送檢樣本編號是否與送檢單一致，填寫樣本接受單。冷凍樣本實驗前需要恢復到室溫（平衡30分鐘）并混勻。
適用儀器.蒸餾水或去離子水.一次性手套和定時器.吸水紙.25ml、100ml、1000ml刻度量筒.酶免自動儀器或者手持單道/多道移液器.適用于盛放污物的容器.溫箱或水浴箱.用于混合微孔內液體的振蕩器.全自動、半自動、手工洗板系統 .酶標儀：單波長450nm或者是雙波長450nm/630nm
質控標準
1：空白孔（只加顯色劑和終止液）的吸光度值應不大于0.08.
2：陽性對照（PC）A450值大于0.30.
3：陰性對照平均A450值小于0.08，如果質控是有效的，實驗結果就是有效的。
結果判定
1：每個實驗結果獨立使用，通過（Cut off）值判定結果。
2：計算臨界值：Cut off (C.O) =0.10+陰性對照平均（NC）A450值（當陰性平均A450值小于0.05時，按0.05計算；當陰性平均A450值大于或等于0.05時按實際值計算）。
3：陰性結果：標本吸光度值﹤臨界值為陰性。陽性結果：標本吸光度值≧臨界值為陽性。
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