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-80℃冰箱凍結法
安瓿管或冷凍管的準備 ATCC細胞 傳代細胞
將安瓿管或冷凍管按3.4步驟清洗干凈,晾干。激光打印標簽,標簽上標明菌株編號和保藏日期,大小約為10×20mm,標簽在管內的位置應距離管底約10mm左右,標簽上有字的一面面向管壁。也可直接將菌株編號和保藏日期直接噴碼在安瓿管或冷凍管表面,安瓿管表面的噴碼要經160℃固定20分鐘才能進行滅菌。塞好棉塞或旋上蓋子,121℃蒸汽滅菌15~20分鐘,60℃烘干備用。
保護劑的準備
選用分析純甘油制備保護劑。用蒸餾水配制10%的甘油溶液作為保護劑,每支試管分裝5mL,121℃蒸汽滅菌15~20分鐘。
人結直腸癌細胞,T84細胞
人胃腺癌細胞,BGC-823細胞
人肝癌細胞,HuH-7細胞
人結直腸腺癌細胞,HCT-8細胞
人結直腸腺癌細胞,HT-29細胞
人結直腸腺癌細胞,COLO 205細胞
人十二脂腸腺癌,HuTu-80細胞
人結直腸腺癌細胞,HCT 116細胞
人結直腸腺癌細胞,LoVo細胞
人胰腺腺泡上皮癌,HPAC細胞
人結直腸腺癌細胞,SW620細胞
人胰腺癌細胞,AsPC-1細胞
人胃癌細胞,MKN-45細胞
人胃腺癌細胞,SGC-7901細胞
人胰腺導管癌細胞,CFPAC-1細胞
人食管癌細胞,EC109細胞
人食管癌細胞,NEC細胞
人結腸腺癌細胞,LS 180細胞
人結直腸腺癌瘤株,HCT 116細胞
人結直腸腺癌細胞,COLO 201細胞
人結直腸癌細胞,DiFi細胞
人肝癌細胞,Hep-3B細胞
人肝腹水腺癌細胞,SK-HEP-1細胞
人肝癌細胞,HHCC細胞
人肝癌細胞,HB611細胞
人胃腺癌細胞,AGS細胞
人非小細胞肺癌細胞,NCI-H838細胞
人肺鱗癌細胞 LTEP-s細胞
人小細胞肺癌細胞 LTEP-sm細胞
人肺鱗癌瘤株 LTEP-s細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H1703細胞
人肺鱗癌細胞 NCI-H2170細胞
人非小細胞肺癌細胞 NCI-H524細胞
人肺腺癌細胞 SPC-A1細胞
人肺癌細胞 A549細胞
人非小細胞肺癌細胞 H125細胞
人肺癌細胞 H1299細胞
人肺癌細胞 TKB-1細胞
人肺腺癌細胞,LTEP-a-2細胞
人肺腺癌細胞,Lu-165細胞
人大細胞肺癌細胞,NCI-H460細胞
人肺腺癌細胞,SPC-A-1細胞
人高轉移肺癌細胞,095-D細胞
人肺鱗癌細胞,SK-MES-1細胞
人大細胞肺癌細胞,NCI-H661細胞
人肺黏液上皮樣癌細胞,NCI-H292細胞
人肺退行性癌細胞,Calu-6細胞
人肺腺癌細胞,NCI-H1395細胞
人非小細胞肺癌細胞,NCI-H358細胞
人非小細胞肺癌細胞,HCC827細胞
人典型小細胞肺癌細胞,NCI-H1688細胞
人非小細胞肺癌細胞,NCI-H1299細胞
人胚肺二倍體細胞,2BS細胞
人支氣管上皮樣細胞,BEAS-2B細胞
人胚肺成纖維細胞,CCC-HPF-1細胞
人胚胎氣管組織來源細胞,CCC-HBE-2細胞
人肺腺癌細胞,Calu-3細胞
人小細胞肺癌細胞,DMS 153細胞
人高轉移肺癌細胞,95-D細胞
人低分化肺腺癌細胞,GLC-82細胞
人肺細胞,HLF-a細胞
人胚肺成纖維細胞,CCC-HPF-1細胞
人胚胎氣管組織來源細胞,CCC-HBE-2細胞
人肺腺癌細胞,Calu-3細胞
保藏培養物的準備
斜面培養物的制備參照附錄A,要求培養至靜止期或成熟期。
無菌條件下將滅過菌的10%甘油5mL用無菌吸管注入到培養好的斜面中,用吸管刮取斜面上的菌體,注意不要將培養基刮破。將菌體與保護劑混勻后用吸管注入到安瓿管或冷凍管內,每支分裝約0.5~1mL,菌懸液中細胞濃度應不低于106個/mL。
保藏
將安瓿管或冷凍管直接置-80℃冰箱中保藏,可保藏2~5年。
恢復培養
從冰箱中取出安瓿管或冷凍管,立即置于38~40℃水浴中復蘇并適當快速搖動,直到內部結冰全部溶解為止。安瓿管復蘇所用時間為40~60秒,冷凍管復蘇所用時間為60~120秒。
用70%酒精棉球將安瓿管或冷凍管擦拭干凈,無菌條件下打開,將菌懸液轉移至麥芽汁或其它適宜培養基上,28~30℃或在其適宜溫度下培養。
人小細胞肺癌細胞,DMS 153細胞
人高轉移肺癌細胞,95-D細胞
人低分化肺腺癌細胞,GLC-82細胞
人肺細胞,HLF-a細胞
人胚肺二倍體細胞,HEL-1細胞
人胚肺二倍體細胞,HEL-2細胞
人肺癌細胞,H1299細胞
人胚肺二倍體細胞,KMB-17細胞
人胚肺細胞系,KuMA細胞
人肺鱗癌細胞,LTEP-s細胞
人小細胞肺癌細胞,LTEP-sm細胞
人肺鱗癌瘤株,LTEP-s細胞
人胚胎心肌組織來源,CCC-HEH-2細胞
人臍靜脈內皮細胞,HUV-EC-C細胞
人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染),ECV-304細胞
人胚胎心臟成纖維樣細胞,HEH2細胞
人肝癌細胞,BEL-7402細胞
人胚胎腸粘膜組織來源細胞,CCC-HIE-2細胞
人正常肝細胞,L-02細胞
人胰腺癌細胞,PANC-1細胞
人肝癌細胞,Hep G2細胞