HCC827細胞培養基、HCC827細胞血清
采用RT-PCR方法從人外周血白細胞總RNA中釣取人可溶性b淋巴細胞刺激因子的cDNA片段,【NIH 3T3細胞 通派細胞庫】 再運用基因重組手段, 利用通用型質粒pBV220構建表達載體pBV220/hsBLyS.
經測序鑒定后, 【Huvec細胞 通派細胞庫】以之為模板使用重疊PCR法擴增得到hsBLyS的兩個點突變體hsBY-A(Cys146→Ala146) 和hsBY-V (Cys146→Val146)的基因片段, 【CNE-2細胞 通派細胞庫】構建表達載體pBV220/hsBY-A及pBV220/hsBY-V.
經測序無誤后, 【Sw1990細胞 通派細胞庫】將上述3種載體分別轉化大腸桿菌DH5α并誘導重組蛋白質表達, 薄層掃描結果顯示3種蛋白質在DH5α中表達量都在20%--30%之間.
再分別運用變性、【MEF細胞 通派細胞庫】 凝膠過濾層析及復性等手段純化目的蛋白質, zui后通過B淋巴細胞增殖實驗檢測純化產物促人B細胞增殖的活性.
實驗結果表明, 【SP2/O細胞 通派細胞庫】3種重組蛋白質都能明顯刺激人B細胞增殖; 統計學檢驗顯示, 【SW1353細胞 通派細胞庫】突變體rhsBY-V較野生型rhsBLyS的促人B淋巴細胞增殖活性顯著增強.
HCC827細胞培養基、HCC827細胞血清
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通派細胞庫作為國內專業培養細胞中心,供應:肝細胞、靜脈內皮細胞、鼻咽癌細胞、巨噬細胞、肝癌細胞、直腸癌細胞、胚腎細胞、肺癌細胞等。
貼壁細胞操作流程:(貼壁細胞生長緩慢)
1)適當提高血清濃度(zui高不能超過20%)。
2)根據該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養。
貼壁細胞操作流程:(生長不均)
貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養
HCC827細胞培養基、HCC827細胞血清細胞包裝:
復蘇細胞(T25培養瓶×1 常溫運輸)
凍存細胞(凍存管、干冰包裝低溫運輸)