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核酸載體轉染細胞HSP90β蛋白的表達(786-O細胞庫)

時間:2018/8/30閱讀:825
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核酸載體轉染細胞HSP90β蛋白的表達(786-O細胞庫)  通派細胞庫擁有專業的細胞生物學技術人員,以專業的技術支撐產品,提供高質量的細胞產品;以、無污染、狀態佳為前提,優惠的價格供應給廣大科研人員,專業的細胞售前,滿意的細胞售后。

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常見細胞問題咨詢:(細胞培養等問題請咨詢細胞庫管理員)

1、細胞復蘇、凍存的操作流程,以及凍存液的配制比例?

2、凍存細胞大概需要多少細胞,下次才能傳代?  

3、hBMSC培養基要求、血清要求、傳代換液要求等?

4、小鼠腎足細胞(含tsSV40T序列)細胞是永生化培養的細胞嗎?有無發表sci文章的case?

了解HSP90β反義核酸轉染細胞中HSP90β蛋白的表達。

通過lipofectamine介導將HSP90β反義核酸重組子pcDNA-HSP90轉染人胃癌細胞系SGC7901、人胃癌多藥耐藥細胞系SGC7901/VCR、人肝癌細胞系HCC7402及人食管癌細胞系Ec109。

(HBZY-1細胞:貼壁細胞     通派細胞庫培養條件:90%  低糖DMEM、10% FBS)

經用G418進行篩選,對篩選出的陽性克隆用western blot檢測HSP90β蛋白的表達。

結果:pcDNA-HSP90轉染人胃癌細胞系SGC7901,人胃癌耐藥細胞系SGC7901/VCR,人肝癌細胞系HCC7402及人食管癌細胞系Ec109后,用G418篩選出的陽性克隆,分別被命名為:AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109。

(HBMEC細胞:貼壁細胞     通派細胞庫培養條件:90% DMEM、10% FBS)

Westernblot檢測結果表明,AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表達的HSP90β蛋白低于其親本細胞。

(HConEpic細胞:貼壁細胞     通派細胞庫培養條件:90%  高糖DMEM、10% FBS)

結論:HSP90β反義核酸可封閉HSP90βmRNA,使pcDNA-HSP90轉染的細胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109表達的HSP90β蛋白減少,為研究HSP90下調對腫瘤細胞生 物學活性的影響提供了實驗材料。

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