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(HCC38細胞株*)甲胎蛋白對HeLa細胞增殖的促進作用

時間:2019/6/20閱讀:695
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(HCC38細胞株*)甲胎蛋白對HeLa細胞增殖的促進作用

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為探討甲胎蛋白(alpha-fetoprotein, AFP)對腫瘤細胞增殖的促進作用. 

用從人臍帶血中提取的AFP作用于體外培養的HeLa細胞, 通過MTT計數、 [3H]-TdR參入法、流式細胞儀等研究細胞增殖, 

并用放射免疫法測定細胞內cAMP、共聚焦顯微鏡掃描細胞內Ca2+濃度等觀察細胞內第二信使物質的改變及測定32P轉移反映細胞內蛋白激酶A(PKA)活性;

用western 印跡分析法分析突變型p53、 p21ras蛋白表達. 結果顯示AFP(濃度大于10 mg/L)對HeLa細胞增殖有明顯的促進作用. 

在AFP(20 mg/L)作用下, HeLa細胞cAMP濃度升高300%; Ca2+濃度大升高154.9%、 PKA活性大升高100%. 突變型p53和p21ras 分別增高81.1%(24 h)和96.2%(24 h). 

抗甲胎蛋白單克隆抗體能有效地阻斷AFP促HeLa細胞增殖作用. 

以上表明, 

(1)AFP具促HeLa細胞增殖的生理功能;
 
(2)AFP促進HeLa細胞增殖的作用是通過影響細胞內cAMP和Ca2+濃度以及PKA活性進而促進一些原癌基因的表達來實現的.

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