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中級(jí)會(huì)員 | 第13年

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ATCC細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞 SKLU1細(xì)胞 SKHEP1細(xì)胞 SKBR3細(xì)胞 SiHa細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞 SCaBER細(xì)胞 Saos-2細(xì)胞 RPMI 8226細(xì)胞 RL95-2細(xì)胞 RKO細(xì)胞 Reh細(xì)胞 RD細(xì)胞 Ramos細(xì)胞 Raji細(xì)胞 QSG-7701細(xì)胞 QGY-7703細(xì)胞 QGY-7701細(xì)胞 PLC/PRF/5細(xì)胞 PC-3細(xì)胞 PANC-1細(xì)胞 PA-1細(xì)胞 OVCAR-3細(xì)胞 OS-RC-2細(xì)胞 NTERA-2細(xì)胞 NCI-N87細(xì)胞 NCI-H838細(xì)胞 NCI-H661細(xì)胞 NCI-H596細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞 NCI-H460細(xì)胞 NCI-H446細(xì)胞 NCI-H358細(xì)胞 NCI-H295R細(xì)胞 NCI-H292細(xì)胞 NCI-H23細(xì)胞 NCI-H209細(xì)胞 NCI-H2087細(xì)胞 NCI-H1975細(xì)胞 NCI-H1650細(xì)胞 NCI-H1688細(xì)胞 NCI-H157細(xì)胞 NCI-H1395細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞 KLE細(xì)胞 LNCaP細(xì)胞 LoVo細(xì)胞 LS180細(xì)胞 LS174T細(xì)胞 MCF 10A細(xì)胞 MCF7細(xì)胞 MEG-01細(xì)胞 MG-63細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞 NAMALWA細(xì)胞
細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
復(fù)蘇細(xì)胞
傳代細(xì)胞
小鼠細(xì)胞
大鼠細(xì)胞
293T細(xì)胞株
TF-1細(xì)胞
Hela細(xì)胞株
胚胎成纖維細(xì)胞

JIMT-1細(xì)胞傳代培養(yǎng)(人乳腺癌細(xì)胞)

時(shí)間:2023/12/19閱讀:394
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細(xì)胞:JIMT-1細(xì)胞

中文名稱:人乳腺癌細(xì)胞

生長特性:貼壁

培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基  血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)

凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞傳代

1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。

2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。

3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。


(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;) 

AIV-H7核酸擴(kuò)增檢測 RNA提取

1):樣品處理

固體組織:取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿或剪刀剪碎,加入500μl RNA提取液A(Trizol reagents),研磨或振蕩至勻漿狀,轉(zhuǎn)移到1.5ml的EP管中,室溫放置5min。

培養(yǎng)物、試子等液體標(biāo)本:將標(biāo)本充分混勻,取100μ液體標(biāo)本加入500μl RNA提取液A(Trizol reagents)充分震蕩,室溫放置5min。

2):加入100μl氯仿,用力震蕩15s,室溫靜置5min, 4℃ 13,000rpm離心5min。

3):小心將上層水相轉(zhuǎn)移到干凈離心管中,加300 μl 無水乙醇,另加10μl RNA提取液B(內(nèi)含不溶物,使用前室溫溶解并充分混勻),充分混勻,13,000rpm離心1min。

4):棄上清,加入500 μl 75%的DEPC乙醇,充分混勻,13,000rpm離心1min,小心吸去大部分乙醇。

5):將提取管敞口在室溫空氣中干燥5min待乙醇揮發(fā)干凈,用20μl DEPC H2O溶解沉淀。

陰性質(zhì)控品:取100μl陰性質(zhì)控品加入500μl RNA提取液A(Trizol reagents)充分震蕩,室溫放置5min。后按2-5操作。

AIV-H7陽性質(zhì)控品: 直接取3μl 進(jìn)行PCR擴(kuò)增。


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