細胞:HCerEpiC細胞
中文名稱:人子宮頸上皮細胞
生長特性:貼壁
培養基:DMEM-H培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
HCerEpiC細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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將不同發育時期的老鼠胚胎運動神經元祖細胞(以Olig2為標記)取出,然后移植到雞胚的脊椎上,并觀察這些祖細胞是否還會分化成運動神經元以及寡突細胞。
晚期老鼠胚胎(E13.5)的運動神經元祖細胞只會進行寡突細胞的分化,但如果此時的運動神經元祖細胞仍具干細胞的特質,當它們在移植到早期仍會產生運動神經元的雞胚(E2) 時,晚期的運動神經元祖細胞理論上應該還是可以同時產生運動神經元以及寡突細胞。
如果將早期老鼠胚胎 (E9.5) 的運動神經元祖細胞移植到雞胚 (E2)后,祖細胞只會分化成運動神經元。
相反,移植晚期老鼠胚胎 (E13.5) 的運動神經元祖細胞移植到雞胚后,卻只能分化成寡突細胞,無法分化成運動神經元。也就是說,運動神經元祖細胞并不如預期般地具有干細胞的特質。
這項研究成果挑戰原來有關運動神經元祖細胞分化過程的假想模式,研究人員在論文中還進一步質疑了位于中樞神經系統其它部位的祖細胞是否也具干細胞的特質。