細胞：THLE-3細胞
中文名稱：人肝細胞
生長特性：貼壁
培養基：BEGM
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
RPAEC細胞傳代：
1）：細胞密度約80%時，吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據實際情況，把握消化時間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。
3）：取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4）：注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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利用新開發的3D生物打印系統打印出的人造耳朵、骨頭和肌肉組織，移植到動物身上后都能保持活性。這項技術未來發展成熟后，可能解決人造移植難題。
當前，3D生物打印技術打印出來的器官組織通常在結構上非常不穩定、過于脆弱，無法用于外科移植手術；并且由于這些成品缺乏血管構造、尺寸也偏小，即便移植，器官也不容易獲取氧和營養物質，很難存活。
研究團隊改進了現有3D生物打印技術，開發出“組織和器官集成打印系統"（ITOP）。這一新開發的3D生物打印系統，可將含有活性人體或動物細胞的水基凝膠與可生物降解的聚合材料結合作為打印材料，有助于人造器官形成穩定結構。
這一系統還能在人造器官中打印出許多類似血管的微小通道。器官組織移植到動物身上后，可通過這些通道獲取氧和營養物質，這是保證移植后存活的關鍵。一段時間后，血管會逐漸在人造器官中生長，取代微型通道。
為驗證效果，研究人員將打印的人造耳朵、肌肉纖維和顎骨移植到小鼠身上。一段時間后，這些人造器官組織都成功存活下來，并長出了血管和神經等結構。
將兩種材料結合的打印過程以及組織結構中的微小通道，為人造器官中的細胞存活、組織生長提供了適當環境。
