細胞：FRH-0201細胞
中文名稱：人膽管癌細胞
生長特性：貼壁
培養基：1640培養基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
FRH-0201細胞傳代：
1）：細胞密度約80%時，吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據實際情況，把握消化時間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。
3）：取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4）：注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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禽白血病病毒(ALV)PCR 結果分析判定:
反應結束后保存檢測數據文件。根據分析后圖像調節baseline的start值（3-8），stop值（13-18）以及Threshold值，使Std curve窗口下的標準曲線達到最佳（correlation數值介于-0.97~-1之間，correlation數值等同于∣r∣值），最后到Reporter窗口下記錄儀器自動分析計算出的未知標本數值（Qty-Copies/ml）。
質控標準:
陰性質控品：全部陰性。
ALV-陽性質控品：陽性質控品的 Ct 值均應小于 35.0。
∣r∣≥0.97（correlation數值介于-0.97~-1之間，correlation數值等同于∣r∣值）。
以上條件應同時滿足 ，否則，此次試驗視為無效，全部試驗應重新進行。
結果判定:
測定結果的計算：
如果Ct值﹤38，則實驗樣品的ALV DNA含量(基因拷貝數/ml)= Qty-Copies/ml；
如果38﹤Ct值﹤40,為灰區建議重新檢測，重新檢測若38﹤Ct值﹤40判為陽性，否則為陰性。
如果Ct值=40，則ALV DNA含量（基因拷貝數/ml）﹤5×10P2PCopies/ml (低于檢測下限)。
