細胞：HFLS-RA細胞
中文名稱：人類風濕關節(jié)炎成纖維樣滑膜細胞
生長特性：貼壁
培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。
HFLS-RA細胞傳代：
1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。
3）：取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
（網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）
鼻疽假單胞菌(BM)核酸擴增檢測
實驗目的:適用于檢測人或動物(馬、騾、驢等)血液、呼吸道分泌物、皮膚潰瘍分泌物及疑似動物肺臟及腸系膜淋巴結等組織標本中鼻疽假單胞菌(BM)DNA，適用于鼻疽假單胞菌(BM)感染的輔助診斷及流行病學調查。其檢測結果僅供參考。
實驗原理：本試劑盒選取一對鼻疽假單胞菌(BM)特異性引物和一條特異性熒光探針，通過堿裂解法提取鼻疽假單胞菌(BM)DNA，后者在耐熱DNA聚合酶(Taq酶)作用下，配以FQ-Buffer(內含MgP2+P、Tris-HCl等)、四種核苷酸單體(dNTPs)等成分，通過PCR-熒光探針體外擴增法對鼻疽假單胞菌(BM)進行擴增，從而達到實時快速定量檢測之目的。
實驗組成：
名 稱數(shù) 量規(guī) 格
（核酸提取液B 4管 500μl/管）（Taq酶系 1管 80μl/管）（BM PCR MIX 1管 960μl/管）
（BM 陽性質控品 1管 50μl/管(1×10P7Copies/ml)）（陰性質控品 1管 500μl/管）
備注：10×RCLB另行配備。
結果判定：
測定結果的計算：
如果Ct值﹤38，則實驗樣品的BM DNA含量(基因拷貝數(shù)/ml)= Qty-Copies/ml；
如果38﹤Ct值﹤40，為灰區(qū)建議重新檢測，重新檢測若38﹤Ct值﹤40判為陽性，否則為陰性。
如果Ct值=40，則BM DNA含量（基因拷貝數(shù)/ml）﹤1×10P2PCopies/ml (低于檢測下限)。
