細胞：HIT-T15細胞
中文名稱：倉鼠beta胰島β細胞
生長特性：貼壁
培養基：1640 培養基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養基，或自己配置的新鮮培養基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時）。
HIT-T15細胞傳代：
1）：細胞密度約80%時，吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據實際情況，把握消化時間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。
3）：取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4）：注意培養基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
（網絡信息主針對網絡推廣作用，僅供參考，細胞培養請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）
鼻疽假單胞菌(BM)核酸擴增檢測：
DNA提取
標本預處理：
1：外周血淋巴細胞分離 (用戶亦可用淋巴細胞分離液分離淋巴細胞)將抗凝血搖勻，取500μl轉至一潔凈的1.5ml 離心管中，編號標記。
2：加入1ml 1×紅細胞裂解液(RCLB,試劑盒配備10×RCLB，使用前請用雙蒸餾水按1：9比例配制成1×RCLB)，劇烈震蕩30s，3,000g離心5min，棄上清。
3：重復 1.2 兩至三次至無明顯紅色沉淀。(若沉淀明顯，請再重復步驟1.2 一次)。
4：加入1ml生理鹽水，劇烈震蕩15s，10000g離心5min，棄上清。
5：肺臟、皮膚及腸系膜淋巴結等固體組織：取適量(500mg)固體組織，用生理鹽水洗凈表面殘余血液，轉至研磨器中，加1ml生理鹽水，研磨成組織勻漿，取50μl組織勻漿轉至1.5ml潔凈的離心管中。
6：呼吸道或皮膚分泌物：充分混勻上述標本，取1ml試子液轉至一潔凈的1.5ml離心管中，13,000g離心1min，棄上清，沉淀加1ml生理鹽水，充分混勻，13,000g離心1min，棄上清。
7：DNA提取：向上述標本中加50μl核酸提取液B（內含不溶物質，用前需室溫溶解并充分混勻），充分混勻，100℃裂解10min，4℃13,000g離心3min，取上清液4μl做PCR擴增。
陰性質控品：取50μl陰性質控品，加50μl核酸提取液B充分混勻(提取液用前需室溫溶解并充分混勻)后100℃10分鐘，13,000rpm離心3分鐘，取上清液4μl做PCR反應。
BM陽性質控品：直接取4μl進行PCR擴增，或按照PCR擴增介紹方法進行定量分析。
