細(xì)胞:HPDE6-C7細(xì)胞
中文名稱(chēng):人正常胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞系
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))。
HPDE6-C7細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
控制機(jī)體上皮細(xì)胞形狀和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)發(fā)生轉(zhuǎn)變的關(guān)鍵機(jī)制,名為ASPP2的腫瘤抑制蛋白的功能就好比是一種分子開(kāi)關(guān),其可以控制并且逆轉(zhuǎn)機(jī)體上皮細(xì)胞的形狀及運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的改變,這對(duì)于解釋一系列生化現(xiàn)象,比如傷口愈合、胚胎發(fā)育及癌癥轉(zhuǎn)移都非常關(guān)鍵。
鑒別出控制控制上皮細(xì)胞可塑性的分子開(kāi)關(guān),這樣的可塑性是癌癥的標(biāo)志,為了發(fā)生轉(zhuǎn)移,癌細(xì)胞會(huì)疏松自身的結(jié)構(gòu),不斷擺動(dòng)脫離母體腫瘤組織,[人HCC38細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人乳導(dǎo)管癌細(xì)胞]進(jìn)而在機(jī)體其它組織器官部位“安家",上述的過(guò)程就稱(chēng)為上皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化過(guò)程及間質(zhì)細(xì)胞向上皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)化過(guò)程(EMT及MET)。
(人H1339細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)
研究發(fā)現(xiàn),在腎小管的發(fā)育過(guò)程中ASPP2蛋白會(huì)促使MET過(guò)程的發(fā)生,從而過(guò)濾掉機(jī)體血液中的廢棄物,而當(dāng)ASPP2蛋白缺失時(shí)會(huì)促進(jìn)EMT過(guò)程的發(fā)生,尤其是在表達(dá)常見(jiàn)癌癥基因RAS細(xì)胞中,EMT過(guò)程尤為明顯,從而就會(huì)引發(fā)癌癥發(fā)生轉(zhuǎn)移。(人HK-2細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人腎小管上皮細(xì)胞)
隨后研究人員對(duì)小鼠模型進(jìn)行試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),當(dāng)小鼠機(jī)體中乳癌細(xì)胞表達(dá)較低水平的ASPP2時(shí),其就會(huì)大量轉(zhuǎn)移至大腦細(xì)胞中,如果這些乳癌細(xì)胞表達(dá)較足量的ASPP2,其轉(zhuǎn)移的能力就會(huì)明顯下降。(人LS180細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)
對(duì)從病人機(jī)體分離的肝臟及乳腫瘤組織進(jìn)行分析,研究者發(fā)現(xiàn),癌癥中ASPP2表達(dá)的欠缺和病人較低的生存率直接相關(guān);
蛋白ASPP2可以通過(guò)和E-鈣粘蛋白及β-連環(huán)蛋白的關(guān)聯(lián)來(lái)控制MET和EMT過(guò)程。(人Colo201細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 )
最后研究者Lu表示,近些年來(lái)我們已經(jīng)對(duì)驅(qū)動(dòng)EMT的過(guò)程研究地非常多了,但是對(duì)于MET過(guò)程的發(fā)生卻知之甚少,而MET過(guò)程對(duì)于機(jī)體的健康及癌癥的轉(zhuǎn)移又至關(guān)重要,鑒別出了MET的誘導(dǎo)子及守護(hù)者,這對(duì)于開(kāi)發(fā)治療癌癥的新型靶向療法提供了新的研究思路和依據(jù)。(人NS-3細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人胃癌細(xì)胞)