細(xì)胞：COS-1細(xì)胞

中文名稱：非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

COS-1細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。

收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

確定DNA修復(fù)的關(guān)鍵步驟，這有可能有助于開發(fā)遺傳性疾病的靶向基因治療法，（人HS-746T細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人胃癌細(xì)胞系）如“月球來的孩子"和結(jié)腸癌的常見形式。這種疾病是由錯誤的DNA修復(fù)系統(tǒng)引起的，該系統(tǒng)提高患癌癥和其它條件的風(fēng)險。

當(dāng)DNA被破壞時，一個特定的蛋白質(zhì)首先必須被“解開扣子"，（人A875細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人黑色素瘤細(xì)胞）以方便獲取DNA的“修理隊"。如果沒有蛋白解開這一過程，進(jìn)入受損位點(diǎn)的這一過程會被染色質(zhì)的緊湊排列的基因和蛋白質(zhì)阻攔。

每個人體細(xì)胞都會遭受各種各樣的攻擊，（人HDQ-P1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）每天最多可以創(chuàng)建100,000個DNA損傷。細(xì)胞必須不斷的修復(fù)這些損傷，以及迅速產(chǎn)生可替代的DNA和蛋白質(zhì)。

RNA聚合酶就像一個小火車頭，（人H2347細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人肺癌細(xì)胞）不斷來回地進(jìn)行DNA的復(fù)制遺傳信息。當(dāng)它達(dá)到蛋白質(zhì)是細(xì)胞所需的一個基因時，它就會停止，并解開雙鏈DNA，然后復(fù)制一條鏈，并將這條鏈發(fā)送到機(jī)器中生產(chǎn)新的蛋白質(zhì)。

當(dāng)DNA遭到紫外線輻射或有害物質(zhì)損壞時，（人A-204細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞）它就會形成一個堅不可摧的塊狀，使得RNA聚合酶停止。就像鐵軌上的巨石，毫無生命的腫塊阻斷了該基因生產(chǎn)所有的蛋白質(zhì)。除非很快就能夠進(jìn)行修復(fù)，否則細(xì)胞就會死亡。

在健康的人群中，酶的維修人員與RNA聚合酶一同移動，（人H441細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人肺腺癌細(xì)胞）并立即沖進(jìn)去切除損傷和消除痕跡。這就是所謂的轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)修復(fù)，或TCT，四個已知的DNA修復(fù)系統(tǒng)之一的一個方面。在任何修復(fù)系統(tǒng)中，甚至只有局部缺陷都有可能導(dǎo)致危及生命的病癥。