細(xì)胞：KYSE520細(xì)胞
中文名稱：人食管癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
KYSE520細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
從受精卵到成年人，人類細(xì)胞需要經(jīng)歷的分裂次數(shù)可以說(shuō)是天文數(shù)字。每一次分裂時(shí)，母細(xì)胞都必須將DNA精確分配給兩個(gè)子細(xì)胞。而著絲粒的完整性是細(xì)胞成功分裂的關(guān)鍵。
（大鼠GH3細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠垂體瘤細(xì)胞）（人T-47D細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳管癌細(xì)胞）
著絲粒是染色體上的一個(gè)特殊DNA區(qū)域，是紡錘絲微管的附著之處，也是姐妹染色單體在分開(kāi)前相互連接的地方。分離染色體的微管要識(shí)別著絲粒，需要該區(qū)域富含一種關(guān)鍵的蛋白——CENP-A。
（人SHG44細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人惡性星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞）（Jurkat細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞）
在細(xì)胞進(jìn)行DNA復(fù)制準(zhǔn)備分裂的時(shí)候，需要確保新舊DNA鏈的著絲粒區(qū)域填充有足夠的CENP-A。在此之前人們只知道著絲粒在G1期填充CENP-A，但并不了解這一過(guò)程的具體調(diào)控機(jī)制。
（小鼠LLC細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠肺癌細(xì)胞）（人SK-BR-3細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞）
研究發(fā)現(xiàn)了兩種確保CENP-A正確填充的關(guān)鍵激酶，Plk1和CDK。這兩種激酶參與了CENP-A填充的不同步驟，只有它們都正常起作用，CENP-A才能填滿著絲粒中的所有空隙。
（人AU565細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞）（人HMSC細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人間充干細(xì)胞）
解析這些激酶的作用途徑，在此基礎(chǔ)上干擾了CENP-A的填充時(shí)機(jī)，研究顯示這種干擾會(huì)引起嚴(yán)重的染色體分離問(wèn)題。著絲粒的功能處于嚴(yán)格的控制之下，因此人們一直認(rèn)為CENP-A的填充時(shí)機(jī)應(yīng)該很重要。
（人HPDLF細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人牙髓成纖維細(xì)胞）（人Calu-3細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人肺腺癌細(xì)胞）
CENP-A填充是著絲粒形成的核心步驟，研究揭示了這一步驟的調(diào)控基礎(chǔ)，有助于深入理解細(xì)胞分裂的具體過(guò)程。
