細胞:NCI-H226細胞
中文名稱:人肺鱗癌細胞
生長特性:貼壁
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養基,或自己配置的新鮮培養基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清(原瓶培養基的繼續使用時間最長不宜超過72小時)。
NCI-H226細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養皿中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4):注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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全基因組深度測序結果顯示,TALEN和HDAdV在基因矯正過程中最大限度地保持了病人基因組的完整性,從而提示了這些方法的安全可靠性。
(鼠BHK-21細胞 來源:通派細胞庫 倉鼠腎細胞)
創建新型人類遺傳突變修復工具,研究人員充分整合TALEN和HDAdV作為基因組靶向修飾工具的優勢,發展出一種新型高效的疾病基因矯正載體telHDAdV。
(人HCT 116細胞 來源:通派細胞庫 人結腸癌細胞)
telHDAdV同時具有TALEN的特異性基因組切割和HDAdV的高導入效率及精確的大片段同源重組效率。同一個telHDAdV可有效涵蓋HBB基因座上所有可能包含的遺傳突變,因此可被廣泛應用于包括鐮刀形細胞貧血癥和地中海貧血癥在內的不同種類的血紅蛋白疾病的基因修復。
(豬ST細胞 來源:通派細胞庫 豬細胞)
實驗結果表明,telHDAdV介導的基因修復比單獨使用TALEN和CPRISPR在效率上約高數十倍,可被應用于不同種類的人類致病基因突變的靶向矯正。
(人Colo 320細胞 來源:通派細胞庫 人結腸癌細胞)
該研究打消了干細胞和再生醫學研究領域針對疾病基因靶向修復安全性的憂慮;同時,新型基因矯正載體的問世也將有助于加速干細胞臨床轉化的步伐。