細(xì)胞:OCM-1細(xì)胞
中文名稱:人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))。
OCM-1細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
單獨(dú)激活HIF2α時(shí),細(xì)胞不會(huì)轉(zhuǎn)化為干細(xì)胞。如果同時(shí)激活HIF1α和HIF2α,HIF2α會(huì)勝出,阻斷干細(xì)胞的形成。深入挖掘發(fā)現(xiàn)HIF2α在細(xì)胞重編程初期的確能促進(jìn)細(xì)胞向糖酵解通路轉(zhuǎn)換;
(小鼠RM-1細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠前列腺癌細(xì)胞)
但當(dāng)該過(guò)程持續(xù)時(shí)間太長(zhǎng)時(shí),HIF2α能上調(diào)腫瘤壞死因子相關(guān)的誘導(dǎo)凋亡配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的表達(dá),該配體會(huì)誘導(dǎo)干細(xì)胞凋亡,阻斷干細(xì)胞的產(chǎn)生。因而,HIF2α既能促進(jìn)細(xì)胞多能性,也能抑制細(xì)胞多能性,這取決于細(xì)胞重編程的不同時(shí)期。
(人U87 MG細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞)
這一發(fā)現(xiàn)有助于干細(xì)胞研究。首先,可以用HIF1α大量產(chǎn)生干細(xì)胞。其次,可以單獨(dú)用HIF蛋白質(zhì)或結(jié)合其他的刺激因子誘導(dǎo)產(chǎn)生干細(xì)胞,并淘汰插入基因阻斷細(xì)胞重編程這種方法。
(猴RF/6A細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 猴脈絡(luò)叢視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)
該發(fā)現(xiàn)也有助于癌癥研究,HIF1α和HIF2α是正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為癌細(xì)胞的重要因子,事實(shí)上,活性HIF1α的存在是入侵性疾病的標(biāo)記。研究人員指出,可以通過(guò)在惡性腫瘤細(xì)胞早期阻斷HIF1α的表達(dá),或者在后期刺激HIF2α的表達(dá)來(lái)阻斷腫瘤生長(zhǎng)。