細胞:TM4細胞
中文名稱:小鼠睪丸細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:D/F12+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
TM4細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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DNA合成方法取得突破
核糖核酸(RNA)不僅是遺傳信息的載體,還是活細胞中生命功能的執行者,是一類重要的檢測靶標,在分子生物學、醫學診斷和疾病治療中受到廣泛的關注。
DT40細胞:懸浮細胞 通派細胞庫培養條件:90% RIMP1640、10% FBS
一般來說,檢測RNA的方法都需要首先被反轉錄酶進行反轉錄形成互補DNA(cDNA),然后在DNA聚合酶的作用下進行擴增檢測。DRG細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
研究者發現,幾種DNA聚合酶具有內在的反轉錄酶活性,即以RNA為模板反轉錄為cDNA的能力,并且這種cDNA能直接作為模板進行后續的擴增實驗。GIST882細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
此項研究的發現,突破了DNA聚合酶只能以DNA為模板合成DNA的傳統觀念,為實現RNA的單酶和一步法檢測提供了酶學基礎。GIST430細胞:貼壁細胞 通派細胞庫培養條件:90% 高糖DMEM、10% FBS
這種一步法檢測可以大大縮短反應時間,降低實驗費用,對核酸的即時檢測,如血液核酸篩查、檢驗檢疫(如艾滋病(AIDS)病毒、埃博拉病毒)等領域具有重要意義。