細(xì)胞：MLO-Y4細(xì)胞

中文名稱(chēng)：鼠成骨細(xì)胞 

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

MLO-Y4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

阿爾茨海默氏病患者神經(jīng)元中的高爾基體為何會(huì)破碎

在阿爾茨海默氏病(Alzheimer’s disease，AD)中，淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)可以被α-，β-，γ-蛋白酶分解；（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：SNB-19細(xì)胞）其中β-蛋白酶和γ-蛋白酶的連續(xù)作用可使APP被分解產(chǎn)生β淀粉樣蛋白(Aβ)。

Aβ可以導(dǎo)致腦內(nèi)老年斑的形成和神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：KNS-89細(xì)胞）是導(dǎo)致阿爾茨海默病的重要因素。高爾基體結(jié)構(gòu)，對(duì)于“將分子傳送到正確位置以形成一個(gè)功能性細(xì)胞"具有重要的作用。

高爾基體類(lèi)似于細(xì)胞的“郵局"，當(dāng)高爾基體破碎時(shí)，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：B2-17細(xì)胞）它就像一個(gè)失控的“郵局"，將“包裹"發(fā)送到錯(cuò)誤的位置，或根本就不發(fā)送它們。

在AD患者神經(jīng)細(xì)胞中通常高度有序的高爾基體結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生這種碎裂。（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：HuT 78細(xì)胞）但是，引起這種缺陷的分子機(jī)制，以及對(duì)疾病發(fā)展的后作用，尚不明確。

研究中發(fā)現(xiàn)，β淀粉樣蛋白累積，可通過(guò)激活cdk5酶(使高爾基體結(jié)構(gòu)磷酸化的蛋白例如GRASP65)，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：H9細(xì)胞）觸發(fā)高爾基體的碎裂。理解這一機(jī)制可有助于解碼阿爾茨海默氏病患者大腦中的淀粉樣斑塊形成，這些斑塊能夠殺死細(xì)胞、引起記憶喪失和其他老年癡呆癥的癥狀。

研究人員發(fā)現(xiàn)了高爾基體碎裂背后的分子過(guò)程，（通派細(xì)胞庫(kù)供應(yīng)：H292細(xì)胞）并開(kāi)發(fā)了兩種技術(shù)來(lái)“拯救"高爾基體結(jié)構(gòu)：要么抑制cdk5，要么表達(dá)GRASP65的一個(gè)突變(其不能被cdk5修改)。這兩種救援措施能夠使有害β淀粉樣蛋白的分泌降低大約80%。