細(xì)胞:PK15細(xì)胞
中文名稱:豬腎細(xì)胞系
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
PK15細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)

癌細(xì)胞借助DNA連接酶III逃避死亡
當(dāng)細(xì)胞反復(fù)分裂時(shí),就會(huì)發(fā)生染色體缺陷。(通派細(xì)胞庫供應(yīng):REH 細(xì)胞)隨著時(shí)間的推移,這些缺陷就會(huì)導(dǎo)致癌癥的發(fā)作,人類細(xì)胞為了生存所需的這些類型的缺陷的一個(gè)特定基因。發(fā)現(xiàn)似乎是在進(jìn)化過程中,可以驅(qū)動(dòng)癌癥的關(guān)鍵基因,這是該基因的新作用,使其成為潛在的治療靶點(diǎn)。
隨著細(xì)胞的分裂,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):OP9細(xì)胞)它們的端粒——保護(hù)染色體末端免受損壞的DNA“帽"——縮短,使殘余的染色體容易彼此粘在一起。在正常細(xì)胞中,這種染色體的粘性是一個(gè)死亡的信號(hào),該信號(hào)能夠觸發(fā)缺陷的細(xì)胞在清理過程中移動(dòng),并幫助清理它們的過程。
惡性細(xì)胞在某種程度上能夠躲避這個(gè)清理過程。(通派細(xì)胞庫供應(yīng):mMSC細(xì)胞)確定一個(gè)允許衰老的細(xì)胞逃避死亡的重要組成部分。使用先進(jìn)的基因靶向技術(shù)使人類細(xì)胞中的特定基因失去活性,然后研究端粒融合的影響;
研究發(fā)現(xiàn)只有當(dāng)連接酶3基因被激活時(shí)而不是它的作用,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):HT29細(xì)胞)細(xì)胞才能逃過一死,這似乎更喜歡推動(dòng)染色體內(nèi)而不是不同的染色體之間的融合。
在許多人類癌癥中,已經(jīng)確定端粒發(fā)生功能障礙,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):WiDr細(xì)胞)研究顯示短端粒可以預(yù)測(cè)慢性淋巴細(xì)胞白血病患者的預(yù)后,可能也可用于很多其他類型的腫瘤,因此,這一過程需要連接酶3的發(fā)現(xiàn)是極其重要的。
進(jìn)一步的研究細(xì)胞逃避死亡依賴于連接酶3,反過來,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):MV522)依賴另一個(gè)關(guān)鍵的DNA修復(fù)基因,p53基因的活性則可修復(fù)細(xì)胞。既然p53是人類腫瘤中最常見的突變基因,這兩個(gè)基因的相互作用,看看是否能夠利用這些信息來制定協(xié)同治療方式。