細胞:AR42J細胞
中文名稱:大鼠胰腺外分泌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
AR42J細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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丙酮酸脫氫酶可從線粒體跳躍到細胞核中
在細胞核中DNA纏繞著稱之為組蛋白的特殊蛋白質。通常情況下,組蛋白使得DNA緊密包裝,阻止了基因表達和DNA復制,后兩者是細胞生長和分裂的必要條件。
為了讓這些至關重要的功能得以執行,(人BT-B細胞 來源:通派細胞庫 人膀胱癌細胞)需要由一種叫做乙酰輔_酶A(acetyl-CoA)的關鍵分子提供乙?;?,附著到組蛋白上對其進行修飾。這種附著使得DNA松弛,允許DNA復制和基因表達。
這一稱作為“DNA表觀遺傳調控"的機制對于正常的功能,(人SBC-2細胞 來源:通派細胞庫 人小細胞肺癌細胞)以及心臟衰竭或癌癥等常見疾病均極為重要。然而直到現在,對于細胞核生成組蛋白乙?;璧囊阴]o_酶A的機制仍不清楚。
研究發現過去被認為僅定位在線粒體內的一種酶: (人Hacat細胞 來源:通派細胞庫 人永生化表皮細胞)丙酮酸脫氫酶復合體(PDC)實際上可以進入到細胞核中,完成它在線粒體中所做的事情:生成乙酰輔_酶A。
在線粒體中時,(小鼠H22細胞 來源:通派細胞庫 小鼠肝癌細胞)PDC利用我們飲食中的碳水化合物來生成乙酰輔_酶A是為了產生能量。而在細胞核中,PDC生成乙酰輔_酶A是為了實現組蛋白乙?;?。