細胞:HL-7702細胞
中文名稱:人肝細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:1640 培養基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
HL-7702細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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NO信號誘導心肌細胞凋亡的機制
長期肺動脈高壓能導致心衰和心肌重塑,最終導致心肌細胞凋亡。這已成為許多心肌疾病的最終結果。但何種因子參與這一過程并不清楚。一氮化氮(NO)信號可能在張力誘導的心肌細胞凋亡中扮演關鍵性角色。(人Raji細胞 來源:通派細胞庫 人Burkitt B淋巴瘤細胞)
研究表明,張力能不僅能誘導內皮型NOS(eNOS),而且還誘導誘導型NOS(iNOS)的表達,促進NO的合成。而持續不斷的iNOS表達增加也在在體的高血壓大鼠心臟中觀察到。(人NC-37細胞 來源:通派細胞庫 人Burkitt B淋巴瘤細胞)
而阻斷NO信號或下調ODQ能顯示抑制張力誘導的心肌細胞凋亡和線粒體去極化,以及Cyt-C釋放過程,這提示NO在張力誘導細胞凋亡中扮演重要角色。(人NAMALWA細胞 來源:通派細胞庫 人Burkitts B淋巴瘤細胞)
進一步研究表明,iNOS表達,但不是eNOS,能被L-NAME和ODQ,因此這種NO信號應該來自于iNOS,而不是eNOS。(鼠MUTZ-1細胞 來源:通派細胞庫 骨髓增生異常綜合征細胞)
進一步采用鈣信號抑制劑處理,同樣能降低NO水平,這表明起始的鈣離子依賴的NO合成,進而誘導iNOS表達,導致NO上升,這是促進心肌細胞凋亡的關鍵信號通路。(大鼠PC12細胞 來源:通派細胞庫 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)