細(xì)胞:MKN-45細(xì)胞
中文名稱:人胃癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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干細(xì)胞培育環(huán)境影響干細(xì)胞分化
研究證實干細(xì)胞會對它們的物理環(huán)境做出響應(yīng),一些研究表明轉(zhuǎn)錄輔激活因子YAP和TAZ將來自環(huán)境的這一機(jī)械信息傳導(dǎo)給了細(xì)胞。檢測了干細(xì)胞能否“記住"過去的環(huán)境,以及這種記憶對于它們命運的影響。
在一組試驗中,研究首先將細(xì)胞置于堅硬的聚苯乙烯表面培養(yǎng),然后將它們轉(zhuǎn)移到一層軟凝膠上,研究發(fā)現(xiàn)在硬基底上培養(yǎng)的細(xì)胞長得更長,促成骨轉(zhuǎn)錄因子RUNX2表達(dá)更高。
(人SK-N-SH細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
為了了解這是否會轉(zhuǎn)化為偏向骨細(xì)胞命運,將培養(yǎng)于軟表面和硬表面的細(xì)胞進(jìn)行了比較。兩種細(xì)胞群都培養(yǎng)于成脂和成骨培養(yǎng)基中。在軟環(huán)境中的細(xì)胞顯示出向脂肪或骨細(xì)胞譜系發(fā)展的跡象。相比之下,轉(zhuǎn)移到較軟表面之前在硬表面上培育較長時間的細(xì)胞更傾向于成骨細(xì)胞命運。
(人SK-HEP-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肝腹水腺癌細(xì)胞)
研究表明人類間充質(zhì)細(xì)胞附著凝膠的硬度與細(xì)胞定型的某些標(biāo)記物之間存在著一些關(guān)聯(lián)。細(xì)胞似乎記住了它們過去在硬底物上的經(jīng)歷。研究將干細(xì)胞培育在光可調(diào)凝膠上,并讓細(xì)胞在硬凝膠上培養(yǎng)不同的天數(shù)。
(人SK-NEP-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)