細胞:mMSCs細胞
中文名稱:小鼠骨髓間充質干細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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干細胞研究的命運倫理問題之爭仍在
成人細胞中的核被移植到卵細胞后,卵細胞中某些未知的因子能將核中的生物鐘回調,使它回到胚胎狀態,但科學家們對這一調控過程的分子機理還一無所知,目前只知道,只有通過卵子細胞才能完成該過程。
因此卵子的獲得將決定干細胞治療能否成功,這一具有抗生素一樣革命意義的新療法,正面臨著卵子供應的瓶頸。
卵子的捐獻程序往往令捐獻者非常不舒服,甚至疼痛,還有發生并發癥的危險。為了刺激排卵,捐卵的女性需要接受激素注射,可能發生激素引發的并發癥;
為了從卵巢中取出卵細胞,往往需要將一根針通過陰插入子宮;少數捐獻者會發生卵巢高度刺激綜合征,這些人中還有少數發生腎衰。
科學家們對卵子的捐獻爭議不斷。即使按照倫理章程獲得卵細胞,人們對卵子捐獻的看法也不一樣,一些科學家堅決主張不用人類卵子,而是用動物的卵細胞進行實驗。
另外是否對捐獻者給予報酬各方意見也不一樣,有的不主張給錢,認為這樣可能導致一些婦女為錢捐獻卵子而忽視甚至無視捐卵子可能帶來的風險;有人主張給錢,通過合同防止一些捐獻者中途退出造成實驗無法繼續。
科學家們認為,由于卵子供應的短缺以及克隆過程的效率無法知道,克隆干細胞在治療領域的運用范圍最終不會很廣,它不會像開個處方藥那么簡單,而是像腎移植療法一樣,只是用于少數特殊病人的治療,比如,為挽救自己的孩子,某位媽媽捐獻自己的一些卵細胞來克隆出干細胞。