C2C12細胞小鼠成肌細胞

時間：2025/1/4閱讀：65

細胞：C2C12細胞

中文名稱：小鼠成肌細胞

生長特性：貼壁細胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）

1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）

2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

3．取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4．注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

分離:理想情況下，一種真正的干細胞系在體外處理前必須在體內(nèi)環(huán)境下來鑒別出來。

但是，目前大多數(shù)分離干細胞的工作都是在體外模擬環(huán)境中進行的。體外分離技術(shù)是建立在對細胞表面標記物的識別基礎(chǔ)上。

已經(jīng)用來純化干細胞的標記包括CD34、AC133、STRO-1、神經(jīng)營養(yǎng)受體p7520等。分離方法包括熒光標記細胞分選、免疫磁分離和免疫吸附柱分離。

最近發(fā)現(xiàn)了一些新奇的細胞標記物陰性的干細胞，因此有些人對使用單一細胞標記物來分離干細胞提出了一些異議。

例如，細胞膜上的CD34表達并不總和干細胞的活動有關(guān)。在小鼠身上有大量靜止的干細胞系，它們?nèi)狈D34的表達，但是卻擁有完_全的再建能力。

一種類似的靜止CD34陰性的造血干細胞也在人體上被發(fā)現(xiàn)。因此，利用某些特定成熟細胞的表面標記物來去除成熟細胞而保留干細胞的方法將會在未來占據(jù)更大的優(yōu)勢。

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