細(xì)胞：C6細(xì)胞

中文名稱：大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-L +10% FBS （GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

TGF-β信號(hào)在人類多種腫瘤如胃腸道腫瘤、乳癌、卵巢癌和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移中均扮演重要角色，且能影響腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感程度。因而，這一信號(hào)通路被視作是重要的癌癥潛在治療靶點(diǎn)。

利用全基因組cDNA篩查研究人員確定了核受體NR4A1是TGF-β信號(hào)一個(gè)強(qiáng)有力的激活因子。NR4A1通過(guò)加速AXIN2–RNF12/ARKADIA誘導(dǎo)SMAD7降解促進(jìn)了TGF-β/SMAD信號(hào)。

研究證實(shí)，NR4A1與SMAD7和AXIN2相互作用，有力且直接地誘導(dǎo)了AXIN2表達(dá)。喪失NR4A1會(huì)抑制TGF-β誘導(dǎo)的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)移，而少量異位表達(dá)NR4A1則可以一種TGF-β依賴性方式刺激轉(zhuǎn)移。

研究發(fā)現(xiàn)炎性細(xì)胞因子可有力地誘導(dǎo)NR4A1表達(dá)，在體內(nèi)外促成TGF-β介導(dǎo)的乳癌細(xì)胞遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移。值得注意的是，在有高度免疫浸潤(rùn)的乳癌患者中NR4A1表達(dá)升高，且NR4A1表達(dá)與磷酸化的SMAD2水平呈弱相關(guān)，是不良預(yù)后的一個(gè)指標(biāo)。

結(jié)果表明在乳癌中炎癥誘導(dǎo)的NR4A1是促癌TGF-β信號(hào)過(guò)度激活的一個(gè)重要的決定因子。