細胞:HePa1-6細胞
中文名稱:小鼠肝癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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對單細胞內的單個脂滴進行了分析。一種叫做拉曼譜學顯微術(Raman spectromicroscopy)的分析工具,使得能夠對活細胞和小鼠中的單個脂滴進行成分分析。
癌細胞需要脂滴儲存庫。而我們的成像數據出人意料地揭示出在高級別前列腺癌和轉移灶的脂滴中有異常膽固_醇酯累積。
研究發現膽固_醇酯只在晚期前列腺癌和轉移灶中發生累積,這是由于腫瘤抑制基因PTEN喪失和一條促進腫瘤生長的細胞內代謝信號通路活化所致。
這些研究結果增進了當前對于膽固_醇在癌癥中所起作用的理解,也為診斷和治療侵襲性前列腺癌指出了一些新機會。研究結果還表明,一類從前開發出來治療動脈粥樣硬化的藥物或許可以用于治療晚期前列腺癌。
這些研究發現有可能帶來新的前列腺癌診斷和治療方法。藥物avasimibe和Sandoz 58-035可以減少實驗室細胞培養物和異種移植物小鼠模型中的膽固_醇酯累積,顯著抑制晚期前列腺癌生長。這些藥物對動物未顯示毒性。
注意到avasimibe、Sandoz 58-035和一類相似藥物被開發出來用于治療動脈粥樣硬化,然而由于不能有效地減小血小板的大小臨床試驗被終止。本研究突顯了可重新利用這些藥物來治療晚期前列腺癌。