細(xì)胞：WI-38細(xì)胞

中文名稱：人胚肺細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：MEM+10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

人的胚胎干細(xì)胞能夠無限自我更新并具有分化全能性，即在體外特定培養(yǎng)條件下能夠分化為來自三胚層的各種細(xì)胞類型，因而為疾病的細(xì)胞治療提供了新的希望。

目前,人的胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞已經(jīng)成功地被應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)各類細(xì)胞的定向分化

例如神經(jīng)干/祖細(xì)胞和神經(jīng)元等，為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的細(xì)胞治療奠定了基礎(chǔ)。

然而要高效安全地實(shí)現(xiàn)hESCs和hNPCs的定向分化，充分利用hESCs和hNPCs的潛能，首先必須清楚地認(rèn)識hESCs和hNPCs自我更新和特性維持的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。

ESCs和NPCs有一個(gè)共同的命運(yùn)決定因子SOX2，它既維持ESCs自我更新又能促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和NPCs的維持，因其功能多樣性而備受科研界的矚目。

Sox2對于小鼠胚胎的存活，滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的分離，小鼠ESCs的建系和體外培養(yǎng)維持有著不可或_缺的作用，同時(shí)它還能促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，維持大腦內(nèi)的NSCs/NPCs數(shù)目，保證神經(jīng)元正常分化。

然而長期以來，大部分的研究都將研究范疇局限于Sox2在模式動(dòng)物ESCs和神經(jīng)系統(tǒng)(Nervous System)中的功能

而關(guān)于這一重要的核心全能性因子在hESCs和hESCs分化而來的hNPCs中的功能和作用機(jī)制研究甚少且存在爭議，且SOX2是如何促進(jìn)ESCs向神經(jīng)分化的，其促神經(jīng)下游基因有哪些都是亟待回答的重要問題。