細(xì)胞:3T3-L1細(xì)胞
中文名稱:小鼠脂肪細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%CS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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新發(fā)現(xiàn)的名為IQ-1的小分子在防止胚胎干細(xì)胞分化成一種或多種特殊細(xì)胞方面具有決定性作用;
該研究成果有望幫助人們開發(fā)出無(wú)污染大規(guī)模培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的方法,干細(xì)胞療法是許多研究的項(xiàng)目,大規(guī)模培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞是干細(xì)胞療法成功發(fā)展的前提。
目前,實(shí)驗(yàn)鼠纖維原細(xì)胞飼養(yǎng)層被證明為能夠培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的方法,必要的化學(xué)信號(hào)能促使胚胎干細(xì)胞不斷分裂而不分化。
人體胚胎干細(xì)胞用飼養(yǎng)層培養(yǎng)會(huì)遭受實(shí)驗(yàn)鼠糖蛋白標(biāo)識(shí)的污染,如果將培養(yǎng)的干細(xì)胞用于人體,或許出現(xiàn)可怕的免疫反應(yīng)。
研究人員發(fā)現(xiàn)的小分子幫助人們向?qū)崿F(xiàn)無(wú)實(shí)驗(yàn)鼠纖維原細(xì)胞飼養(yǎng)層培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞的方法往前邁進(jìn)了一步。
對(duì)于IQ-1的工作原理,Wnt通道(也就是細(xì)胞信號(hào)通道)對(duì)干細(xì)胞具有分叉效應(yīng),IQ-1能夠在阻斷Wnt通道一個(gè)分叉的同時(shí),增強(qiáng)來自Wnt通道另分叉的信號(hào)。
人們可以從根本上維持干細(xì)胞的生長(zhǎng)和所需的力量,如果人們能夠創(chuàng)造出一個(gè)化學(xué)物質(zhì)環(huán)境的系統(tǒng)來培養(yǎng)人體胚胎干細(xì)胞,那么就可以避免干細(xì)胞受污染的危險(xiǎn),它將讓科學(xué)家的工作更加容易,這是研究小組的奮斗目標(biāo)。