細胞:A375細胞
中文名稱:人惡性黑色素瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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顯微鏡可三維觀察癌癥活體細胞
在關于哪些因素可以改變細胞與周圍環境相互作用的研究中,研究人員發明了一種顯微鏡,可用于三維觀察活體癌癥(cancer)細胞,而且每個方向像素都很高。
在此之前,高像素活體成像一直用玻璃片上培養的細胞進行,這種方式會讓樣本變平。
由于活體細胞對其周圍環境高度敏感,因此用膠原質代替玻璃片的新微觀方法有助于揭示更加自然的行為。
這種叫作微環境選擇性平面照明顯微鏡(meSPIM)的技術利用又長又細的激光束在樣本中產生熒光,使其發光,它可以揭示小至300納米的細節。
同時在模擬真實組織的樣本中又可以保持較廣泛的視野。這可以讓研究人員觀察復雜的過程,如在癌癥(cancer)和非癌癥(cancer)組織中的細胞信號傳導。
在此過程中,研究人員發現黑色素瘤(melanoma)細胞在膠原質中的表現和玻璃片下的表現不同,會形成更多被稱為“皰疹"的圓形凸起。
研究人員可以測量這些皰疹的大小和形狀,并利用量化顯微鏡觀察目標的數量,并計算特殊蛋白的分布。這些圖像可以幫助研究人員了解癌癥(cancer)細胞如何入侵其他組織。