細胞:HMVEC-L細胞
中文名稱:人肺微血管內皮細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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胚胎干細胞分化研究的一些動向
實驗室將人的胚胎干細胞株H1與小鼠的骨髓來源的細胞或卵黃來源的細胞共培養, 1-2%分化的H1細胞表現CD34+,CD38-,這是早期造血干細胞的表型。
在半固體培養條件下,這些造血祖先細胞形成紅細胞和巨核細胞。人類胚胎干細胞體外分化為研究人類造血過程提供了基礎,也為移植和輸血提供了新的細胞來源。
研究了胚胎干細胞H9株體外自發分化為內皮細胞。
利用血小板內皮細胞吸附分子-1(platelet endothelial cell-adhesion molecule-1,PECAM1)抗體分離胚胎干細胞來源的內皮細胞,并對這些細胞的特點進行了研究。
當把這些細胞移植入SCID小鼠時,這些細胞形成微血管并含有小鼠的血細胞。這些細胞有可能為組織工程,內皮細胞移植等提供細胞來源。
科研人員利用肝臟特異性標記物證明小鼠胚胎干細胞在體外可分化為肝細胞。這一體外肝細胞分化模型系統可用于研究肝細胞譜系特化中的特異因子。
此外,在體外應用基質細胞來源的誘導活性(stromal cell-derived inducing activity, SDIA)誘導靈長目動物胚胎干細胞向神經元分化,并產生多巴胺。他們發現胚胎干細胞向神經元分化在體外(10天)比在胚胎(5周)快得多。