科研抗體 單克隆抗體在檢測中的應用
1暢單克隆抗體在熒光染色技術中的應用 不同細胞表達不同的表面標志,同一種細胞在不同時期也 可表達不同的標志。以熒光素標記單克隆抗體并采用熒光流式細胞儀(FACS)技術是檢測和分析細胞表 面標志、分離不同細胞亞群zui、zui簡捷的實驗方法。如果采用FITC、PE、PerCP 等多色熒光標記,可對 細胞進行雙色染色或多色染色。*的CD 系列單克隆抗體已達200 多種,通過計數帶有不同CD 標 志的細胞數,可了解血細胞及其亞群變化,可鑒定血細胞性疾病。
熒光素標記的單克隆抗體還可用于對生物活性分子細胞內示蹤。核轉錄因子NF -κB 在非轉錄狀態 時位于胞質內,當激活時可進入細胞核,調節相關基因的轉錄。采用熒光標記的特異性抗體可對NF -κB 進行細胞內定位,從而了解細胞的狀態。抑癌基因表達的p53 蛋白與細胞周期調節及細胞凋亡有關,通常 其在細胞內的半衰期很短,常規方法難以檢測。當發生突變時,則半衰期延長,引起在細胞內聚集,采用熒 光標記的特異性抗體,可檢測細胞內p53 蛋白聚集狀況。
2暢單克隆抗體在放射免疫分析中的應用?。保梗担?年,Yalow 等建立的放射免疫分析法(RIA),是超微量 分析*的一次突破。其原理是用放射性核素標記抗原(圖22 -5),與被測抗原競爭相應的抗體,核素標記的抗原抗體復合物越多,則被測抗原越少,反之亦然。McAb 問 世以來,因其可大批量生產,并且具有高度特異性和均一性,使放射 免疫檢測的實驗結果準確度更高,重復性更好。在研究激素與內分 泌疾病的關系、診斷內分泌疾病及評判治療效果等方面具有重要意 義。
單克隆抗體還應用于興奮劑檢測之中,如區分人體內的內源性 促紅細胞生成素(EPO)和攝入性EPO,必須采用高特異性的單克隆 抗體予以鑒別。
3暢單克隆抗體在酶免疫分析中的應用 細胞因子在免疫調節過程中扮演重要角色,由辣根過氧化物 酶標記的抗細胞因子單克隆抗體等試劑所建立的夾心ELISA 方法,可檢測人體體液中絕大部分微量存在 的細胞因子,對評價細胞因子參與免疫調節和免疫病理過程具有重要意義。McAb 還能用于微生物的鑒 別,應用McAb 不僅能鑒別不同的病原體,還能鑒別相同病原體不同的種、型、亞型以及不同生活周期的抗 原性變化。流感病毒經常發生變異,由此引起反復流行。單克隆抗體可分辨流感病毒微小變異,對流感快 速診斷,流行預測和疫苗的制備具有重要意義。
3暢單克隆抗體在酶免疫分析中的應用 細胞因子在免疫調節過程中扮演重要角色,由辣根過氧化物 酶標記的抗細胞因子單克隆抗體等試劑所建立的夾心ELISA 方法,可檢測人體體液中絕大部分微量存在 的細胞因子,對評價細胞因子參與免疫調節和免疫病理過程具有重要意義。McAb 還能用于微生物的鑒 別,應用McAb 不僅能鑒別不同的病原體,還能鑒別相同病原體不同的種、型、亞型以及不同生活周期的抗 原性變化。流感病毒經常發生變異,由此引起反復流行。單克隆抗體可分辨流感病毒微小變異,對流感快 速診斷,流行預測和疫苗的制備具有重要意義。
4暢單克隆抗體在定位檢測中的應用 放射性核素99m Tc 等標記單克隆抗體,通過靜脈、腹腔或腰椎穿 刺等方式進入機體后,可特異性地與靶抗原結合,顯示抗原分子和組織細胞的機能狀態。這種檢測方法稱 為功能顯像,又稱為放射免疫顯像(radioimmunoimaging,RⅡ)。RⅡ可進行腫瘤的分類和鑒別診斷,可確 定腫瘤的原發病灶及轉移部位,并可確定腫瘤大小。RⅡ還可用于心肌壞死病灶的定位測定、血栓的定位 測定以及炎癥病灶的探測。
4暢單克隆抗體在定位檢測中的應用 放射性核素99m Tc 等標記單克隆抗體,通過靜脈、腹腔或腰椎穿 刺等方式進入機體后,可特異性地與靶抗原結合,顯示抗原分子和組織細胞的機能狀態。這種檢測方法稱 為功能顯像,又稱為放射免疫顯像(radioimmunoimaging,RⅡ)。RⅡ可進行腫瘤的分類和鑒別診斷,可確 定腫瘤的原發病灶及轉移部位,并可確定腫瘤大小。RⅡ還可用于心肌壞死病灶的定位測定、血栓的定位 測定以及炎癥病灶的探測。