P19細(xì)胞小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞 原代培養(yǎng) 細(xì)胞*
1.原代培養(yǎng)期(primary culture)
組織到*次傳代 時間大約為1~4周 細(xì)胞培養(yǎng)
特點(diǎn):
細(xì)胞活躍移動,分裂,但不旺盛多呈二倍體核型。
原代與體內(nèi)原組織形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動基本相似。
各細(xì)胞的遺傳性狀互不相關(guān),細(xì)胞相互依存性強(qiáng),如果把這種稀釋分散成單細(xì)胞,在軟瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞克隆的形成率(cloning efficiency)下降,表明細(xì)胞獨(dú)立生存性差。
2.P19細(xì)胞小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞 原代培養(yǎng) 細(xì)胞*傳代期(passage)
初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代便稱之為細(xì)胞系(cell line)
特點(diǎn):
細(xì)胞增殖旺盛,并維持二倍體核型,也叫二倍體細(xì)胞系(diploid cell line)為了保存二倍體細(xì)胞性質(zhì),細(xì)胞應(yīng)在初代或傳代早期凍存為好。
一般細(xì)胞在10代以內(nèi)凍存。
凍存配方:
向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑二甲基亞砜(DMSO)或甘油,封入安瓶中。
存于在液氮中溫度可達(dá)到-196℃,可長期儲存。如解凍后細(xì)胞復(fù)蘇,仍能繼續(xù)增殖生長,細(xì)胞性狀不受影響,成為保存細(xì)胞zui主要的手段。
3.衰退期
特點(diǎn):細(xì)胞仍生存 增殖減慢 不增殖 輪廓增強(qiáng) 衰退凋亡
注意:細(xì)胞在三期中的任何一期(一般發(fā)生在傳代后期或衰退期)在某些因素影響下,如血清質(zhì)量不佳、病毒污染、溫度和pH不穩(wěn)等,細(xì)胞可能發(fā)生自發(fā)轉(zhuǎn)化(spontaneous transformation);
細(xì)胞可能獲得永生性(immortality) 或稱為惡性性(malignancy)。細(xì)胞獲得持久性的增殖能力,這樣的細(xì)胞群體稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line)。而細(xì)胞獲得不死性后,細(xì)胞核型大多變成異倍體(heteroploid)接觸抑制消失。
P19細(xì)胞小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞 原代培養(yǎng) 細(xì)胞*
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞 Daudi細(xì)胞
細(xì)胞英文名稱 Daudi細(xì)胞中文名 人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣 生長特性 懸浮生長
培養(yǎng)基 RPMI 1640 (w/o Hepes)
血清 10%FBS 其它因子 無
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在0.3~3×106 cells/ml之間,2~3天換液1次。傳代情況 C4
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測 陰性
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞 DCS細(xì)胞
細(xì)胞英文名稱 DCS細(xì)胞中文名 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞
形態(tài)特性 梭形,胞突呈分枝狀,常有大小粗細(xì)不等的胞突 生長特性 貼壁生長
培養(yǎng)基 RPMI 1640 (w/o Hepes)
血清 10%CS 其它因子 無
傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天1次。傳代情況 P22
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測 陰性
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 EL4細(xì)胞
細(xì)胞英文名稱 EL4細(xì)胞中文名 小鼠淋巴瘤細(xì)胞
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣生長特性 懸浮生長
培養(yǎng)基 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)
血清 10%HS 其它因子 無
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在0.1~1×106 cells/ml之間,2~3天換液1次。 傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測 陰性
A549 [A-549]細(xì)胞人肺癌細(xì)胞A549 [A-549]細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞中國倉鼠卵巢細(xì)胞(二氫葉酸還原型缺陷型)CHO/dhFr-細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆)CHO-K1細(xì)胞
Cyc-Tag(S49)細(xì)胞小鼠T淋巴瘤細(xì)胞Cyc-Tag(S49)細(xì)胞
DU 145 [DU145;DU-145]人前列腺癌細(xì)胞DU 145 [DU145;DU-145]
FDC-P1細(xì)胞小鼠骨髓細(xì)胞FDC-P1細(xì)胞
GH3細(xì)胞大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞小鼠垂體瘤細(xì)胞GT1-1細(xì)胞
293 [HEK-293;HEK293]細(xì)胞人胚腎細(xì)胞 293 細(xì)胞
HeLa細(xì)胞人宮頸癌細(xì)胞HeLa細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞
MCF7 [MCF-7]細(xì)胞人乳腺癌細(xì)胞MCF7 [MCF-7]細(xì)胞
MDA-MB-231細(xì)胞人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞
MDA-MB-435S細(xì)胞人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435S細(xì)胞
MDA-MB-453細(xì)胞人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-453細(xì)胞
NG108-15 [108CC15]細(xì)胞小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞與大鼠膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞之融合細(xì)胞NG108-15 [108CC15]細(xì)胞
NIH/3T3細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH/3T3細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞NTERA-2細(xì)胞
P19細(xì)胞小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞P19細(xì)胞
PA-1細(xì)胞人卵巢畸胎瘤細(xì)胞PA-1細(xì)胞
PA12細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞PA12細(xì)胞
PANC-1細(xì)胞人胰腺癌細(xì)胞PANC-1細(xì)胞
PC-12 [PC12]細(xì)胞大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12 [PC12]細(xì)胞
Saos-2細(xì)胞人成骨肉瘤細(xì)胞Saos-2細(xì)胞
SH-SY5Y細(xì)胞人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞
SK-OV-3 [SKOV3]細(xì)胞人卵巢腺癌細(xì)胞SK-OV-3 [SKOV3]細(xì)胞
U-2OS 細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞U-2OS 細(xì)胞