人肺癌細(xì)胞H1299細(xì)胞株來源

1．酶標(biāo)抗體的制備
2．取材 將培養(yǎng)細(xì)胞或懸浮細(xì)胞用0.1Mol/L PBS液沖洗，離心沉淀后，立即轉(zhuǎn)入固定液(2%甲醛液或2%戊二醛液均可)pH 7.2，4℃固定5min～30min(依抗原性質(zhì)所定)。如病料為組織塊，則取適當(dāng)大小，先固定1h然后取出，以新的雙面刀片切成50～100μm的薄組織再行固定1h～2h。
3．漂洗 以PBS液漂洗過夜，換液3～4次。
4．血清孵育，25℃1h或4℃過夜，孵育的標(biāo)本放置于加蓋的瓷盤內(nèi)，底層墊數(shù)層紗布。防止抗血清干燥凝固，不易洗脫，造成非特異性吸附。
5．PBS沖洗3～4次，每次10min。
6．2.5%戊二醛再固定15min～30min。
7．PBS液沖洗3～4次每次10min。
8．酶標(biāo)記抗體孵育；用適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)抗體(即工作濃度)于25℃濕盆內(nèi)孵育1h或4℃過夜。
9．PBS液沖洗3～4次每次10min或4℃漂洗過夜。
10．酶顯色處理 將漂洗后的標(biāo)本浸入DAB－H2O2底物溶液中，20℃，10min～30min。顯色強(qiáng)弱與戊二醛的固定有關(guān)。若顯色弱則可減少甚至取消戊二醛的固定時間。沖洗時必須注意防止非特異漂浮的沉積。
11．常規(guī)包埋、切片、電鏡觀察 在經(jīng)過脫水包埋確定抗原性不致引起失活的前提下可在包埋切片后做標(biāo)記染色，切片一般在2μm～4μm，切片后染色不存在通透困難的問題。無論在標(biāo)記染色后切片還是在切片后標(biāo)記染色，在光鏡下定位選擇后，再做電鏡定位包埋，這樣目的性強(qiáng)，可減少工作量。

人肺癌細(xì)胞H1299細(xì)胞株來源：

人肺癌細(xì)胞TKB-1  
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2  
人肺腺癌細(xì)胞Lu-165  
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460  
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A-1  
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞095-D  
人肺鱗癌細(xì)胞SK-MES-1  
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H661  
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞NCI-H292  
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6  
人肺腺癌細(xì)胞NCI-H1395  
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H358  
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞HCC827  
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1688  
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299  
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS  
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B  
人胚肺成纖維細(xì)胞CCC-HPF-1  
人胚胎氣管組織來源細(xì)胞CCC-HBE-2  
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3  
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6  
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS 153  
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞95-D  
人低分化肺腺癌細(xì)胞GLC-82  
人肺細(xì)胞HLF-a  
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1  
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2  
人肺癌細(xì)胞H1299  
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞HCC827  
人胚肺二倍體細(xì)胞KMB-17  
人胚肺細(xì)胞系KuMA  
人肺鱗癌細(xì)胞LTEP-s  
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞LTEP-sm  
人肺鱗癌瘤株LTEP-s  
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2