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中級會(huì)員 | 第13年

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ATCC細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞 SKLU1細(xì)胞 SKHEP1細(xì)胞 SKBR3細(xì)胞 SiHa細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞 SCaBER細(xì)胞 Saos-2細(xì)胞 RPMI 8226細(xì)胞 RL95-2細(xì)胞 RKO細(xì)胞 Reh細(xì)胞 RD細(xì)胞 Ramos細(xì)胞 Raji細(xì)胞 QSG-7701細(xì)胞 QGY-7703細(xì)胞 QGY-7701細(xì)胞 PLC/PRF/5細(xì)胞 PC-3細(xì)胞 PANC-1細(xì)胞 PA-1細(xì)胞 OVCAR-3細(xì)胞 OS-RC-2細(xì)胞 NTERA-2細(xì)胞 NCI-N87細(xì)胞 NCI-H838細(xì)胞 NCI-H661細(xì)胞 NCI-H596細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞 NCI-H460細(xì)胞 NCI-H446細(xì)胞 NCI-H358細(xì)胞 NCI-H295R細(xì)胞 NCI-H292細(xì)胞 NCI-H23細(xì)胞 NCI-H209細(xì)胞 NCI-H2087細(xì)胞 NCI-H1975細(xì)胞 NCI-H1650細(xì)胞 NCI-H1688細(xì)胞 NCI-H157細(xì)胞 NCI-H1395細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞 KLE細(xì)胞 LNCaP細(xì)胞 LoVo細(xì)胞 LS180細(xì)胞 LS174T細(xì)胞 MCF 10A細(xì)胞 MCF7細(xì)胞 MEG-01細(xì)胞 MG-63細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞 NAMALWA細(xì)胞
細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
復(fù)蘇細(xì)胞
傳代細(xì)胞
小鼠細(xì)胞
大鼠細(xì)胞
293T細(xì)胞株
TF-1細(xì)胞
Hela細(xì)胞株
胚胎成纖維細(xì)胞

人包皮成纖維細(xì)胞 HFF細(xì)胞

時(shí)間:2014/9/2閱讀:1215
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人包皮成纖維細(xì)胞 HFF細(xì)胞 細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)
具體操作:
一. 傳代前準(zhǔn)備:
1.預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,放入微波爐內(nèi)高火,8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液:取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋,人包皮成纖維細(xì)胞 HFF細(xì)胞 用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面,再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。
 
 
細(xì)胞庫常用細(xì)胞:
人包皮成纖維細(xì)胞HFF  
人羊膜細(xì)胞WISH  
人羊膜細(xì)胞HA  
人胚胎干細(xì)胞E1C4  
人羊膜細(xì)胞HAN  
人宮頸癌細(xì)胞HeLa  
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞PA-1  
人卵巢腺癌細(xì)胞SK-OV-3  
人宮頸癌細(xì)胞Ca Ski  
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞HEC-1-B  
人胎盤絨膜癌細(xì)胞BeWo  
人宮頸癌細(xì)胞C-33A  
人胚胎干細(xì)胞E1C2  
人宮頸癌細(xì)胞Hela P10s-11F  
人宮頸癌細(xì)胞Hela S3  
人子宮頸癌細(xì)胞(GFP基因修飾)HeLa-GFP  
人卵巢癌細(xì)胞Caov-3  
人宮頸癌細(xì)胞H1HeLa  

二.胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出舊培養(yǎng)液,用PBS清洗(沖洗),人包皮成纖維細(xì)胞 HFF細(xì)胞 加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細(xì)胞,*消化溫度是37℃。
2. 顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度。
3.吸棄消化液加入培養(yǎng)液:棄去胰蛋白酶液,注意更換吸管,加入新鮮的培養(yǎng)液。
 
人卵巢癌細(xì)胞A2780  
人宮頸癌細(xì)胞Hela 229  
人卵巢癌細(xì)胞HO-8910  
人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)HCC-94  
人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞ES-2  
人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞SiHa  
人胚胎干細(xì)胞Endeavour-1  
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞HEC-1-A  
人胎盤絨毛癌細(xì)胞JAR  
人卵巢癌細(xì)胞COC1  
人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞RL95-2  
人卵巢腺癌細(xì)胞OVCAR-3  
人胚胎干細(xì)胞HES 3.3  

三.吹打分散細(xì)胞:
1.吹打制懸:用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液。
2.吸細(xì)胞懸液入離心管:將細(xì)胞懸液吸入10ml離心管中。
3.平衡離心:平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中,以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心6-8分鐘。
4.棄上清液,加入新培養(yǎng)液:棄去上清液,加入2ml培養(yǎng)液,用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。

人胚胎干細(xì)胞SH.hEXl(46.xx)  
人胚胎干細(xì)胞HES 3.2  
人胚胎干細(xì)胞HES 3.1  
人胚胎干細(xì)胞E1C1  

人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞HFSF  
人胚胎眼 Tenon's囊成纖維細(xì)胞HFTF  
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤WERI-Rb-1  
人鼻咽癌細(xì)胞CNE  
人舌鱗癌細(xì)胞CAL-27  
人喉癌上皮細(xì)胞Hep-2  
人舌鱗癌細(xì)胞Tca-8113 
 
四.分裝稀釋細(xì)胞:
1.分裝:將細(xì)胞懸液吸出分裝至2-3個(gè)培養(yǎng)瓶中,加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋。
2.顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量,必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長,傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于5×105/ml。zui后要做好標(biāo)記。

人咽鱗癌細(xì)胞FaDu  
人舌鱗癌細(xì)胞Tca8113-P60  
人口腔表皮樣癌細(xì)胞KB  
人鼻咽癌細(xì)胞CNE-2Z  
KM9304 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞(彝族)  
人淋巴細(xì)胞1301  
 人類粒細(xì)胞系Human Cell line 1D3  
人永生化淋巴細(xì)胞CNLMG-B5537LC  
人類成纖維細(xì)胞CNLMG-B5537SKIN  
人 EB病毒轉(zhuǎn)化的 B細(xì)胞CGM1  
  
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 14C1  
人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60  
人慢性髓系白血病細(xì)胞K562  
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞MOLT-4  
人 Burkitt淋巴瘤細(xì)胞Raji  
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Ramos  
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1  
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞U937  
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat, Clone E6-1  
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞株M-07e  
人紅系白血病細(xì)胞TF-1  
人原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞UT-7  
人 Burkkit淋巴瘤細(xì)胞Daudi  
人T淋巴瘤細(xì)胞(Tet-on基因修飾)Jurkat D,E  
人T淋巴瘤細(xì)胞 Jurkat亞系Jurkat77  
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞TALL-104  
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞HuT 78  
人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞I 2.1  
人伯基特淋巴瘤細(xì)胞EB-3  
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat  
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞JurkatE6-1  
IL-2依賴的人淋巴 T細(xì)胞系Kit225  
人T細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166  
人急性骨髓白血病細(xì)胞KG-1a  

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