肝細(xì)胞培養(yǎng) NCTC1469細(xì)胞小鼠正常肝細(xì)胞
初代組織塊培養(yǎng):
取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養(yǎng)法。
初代消化法培養(yǎng):
把肝組織切成2~4立方毫米的小塊,用不含鈣鎂的BSS液洗兩次。移入1:1的0.1%胰蛋白酶和0.1%膠原酶(都用無(wú)鈣鎂BSS配置)中,4℃冷消化10~12小時(shí)后,通過(guò)250微米和64微米尼龍網(wǎng)或不銹鋼紗網(wǎng)濾過(guò)。
收集細(xì)胞、BSS液洗1~2次、計(jì)數(shù)、接種培養(yǎng)。肝細(xì)胞培養(yǎng) NCTC1469細(xì)胞小鼠正常肝細(xì)胞 消化培養(yǎng)肝細(xì)胞的另一種方法是灌流法;肝臟灌流需用全肝,以較小動(dòng)物如小鼠和大鼠為好。
無(wú)菌解剖動(dòng)物,取出肝臟,先用BSS洗除血污。取5ml注射器一支,吸取消化液后,把注射器頭輕輕插入肝管中,用線繩結(jié)扎牢固,以防消化液漏出,輕輕把消化液注入肝管系統(tǒng),并不時(shí)輕揉壓肝臟,以便消化液進(jìn)入肝小葉中;
消化液在肝內(nèi)停留20~30分后,在吸出消化液的同時(shí)并輕揉壓肝臟,以使肝細(xì)胞脫落和消化液吸出。
待吸凈消化液后,注入離心管中,低速離心分離,用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)(較其它培養(yǎng)基為好),能獲得較純的肝上皮細(xì)胞和獲較好的效果。
傳代培養(yǎng):
待細(xì)胞生長(zhǎng)連接成片后,用BSS洗一二次,肝細(xì)胞培養(yǎng) NCTC1469細(xì)胞小鼠正常肝細(xì)胞 加1:1的0.025%胰蛋白酶和0.02%EDTA混合消化3~5分鐘,待細(xì)胞回縮,便停止消化,棄掉消化液,用BSS洗一二次,注入營(yíng)養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液,再接種培養(yǎng)。
KP-N-NS 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
LS 180 (CL-187) [LS180] 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
LTEP-s 人肺鱗癌細(xì)胞
LTEP-sm 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
M5076 小鼠卵巢網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤細(xì)胞
MDBK 牛腎細(xì)胞
NCI-H205 人腎上腺腺瘤細(xì)胞
NCTC 1469 [NCTC1469] 小鼠正常肝細(xì)胞
Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
OS-RC-2 人腎癌細(xì)胞
RD 人惡性胚胎橫紋肌肉瘤細(xì)胞
SiHa 人子宮頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
Tca-8113 [Tca8113] 人舌鱗癌細(xì)胞
TM3 正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞
TM4 正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞
ΦA 人胚腎細(xì)胞(293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞)
ΦA-GP 人胚腎細(xì)胞(293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞)
Ca759 小鼠乳腺癌瘤株
Ca761 小鼠乳腺癌瘤株
Ca763 小鼠乳腺癌瘤株
L7712 小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株
L7912 小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株
HP615 小鼠肺癌瘤株
ZM755 小鼠滑膜肉瘤瘤株
P615 小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株
H22 小鼠肝癌瘤株
Fc 小鼠前胃癌瘤株
U14 小鼠子宮頸癌瘤株
U27 小鼠子宮頸癌瘤株
LⅡ 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株
G422 小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株
L615 小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株
W256 Walker癌肉瘤256瘤株
Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株
LA795 小鼠肺腺癌瘤株
S-180 [S180] 小鼠肉瘤瘤株
VX2 兔間變表皮鱗癌瘤株
ME (Me) 小鼠黑色素瘤瘤株
DCS 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤瘤株
B22 小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株
B16 小鼠黑色素瘤瘤株
LLT 小鼠Lewis肺癌瘤株
BNL.1ME A.7R.1 小鼠肝瘤株
A-375 [A375] 人惡性黑色素瘤瘤株
MCF7 [MCF-7] 人乳腺癌瘤株
Calu-3 人肺腺癌瘤株
LTEP-s 人肺鱗癌瘤株
HCT 116 [HCT116] 人結(jié)直腸腺癌瘤株
HeLa 人宮頸癌瘤株
769-P 人腎癌細(xì)胞
ACHN 人腎上腺癌細(xì)胞
BT-20 人乳腺癌細(xì)胞
BT-549 [BT549] 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
Caki-2 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞
CAL-27 人舌鱗癌細(xì)胞
Caov-3 人卵巢癌細(xì)胞
COLO 201 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
D283 人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞
DU4475 人乳腺上皮細(xì)胞
EB-3 人伯基特淋巴瘤細(xì)胞
H1HeLa 人宮頸癌細(xì)胞
HS 683 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
J82 人膀胱癌細(xì)胞
Jurkat 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
JurkatE6-1 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞
MDA-MB-175Ⅶ 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
MDA-MB-415 人乳腺癌細(xì)胞
MDA-MB-435 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞
MDA-MB-436 人乳腺癌細(xì)胞
NCI-H1703 人肺鱗癌細(xì)胞