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上海麗臣商貿有限公司
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閱讀：293發布時間：2014-06-11
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大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒 | Rat Big Endothelin,Big ET ELISA試劑盒 |
大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒說明
試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。
剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正?，F象，不會對實驗結果造成任何影響。
有效期：6個月
預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
（2）酶標記的抗原或抗體（結合物）；
（3）酶的底物；
（4）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；
（5）結合物及標本的稀釋液；
（6）洗滌液；
（7）酶反應終止液
大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒實驗待測樣品簡述：大內皮素(big-ET)是內皮素-1(ET-1)的具有活性的前體,測定它可以得到ETszui可靠的信息。內皮素(endothelium,ET)是心功能受損,心力衰竭過程中的重要神經內分泌因子之一。ET有ET-1,ET-2,ET-3等3種異構體,臨床上將ET-1的前體大內皮素-1(big endothelium-1,bigET-1)作為ET-1系統活性的指示劑。
大鼠大內皮素(Big ET)ELISA試劑盒ELISA實驗注意事項：
1）ELISA實驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制實驗條件，待檢樣品應一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清等封閉。
2）在ELISA實驗中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：
（1）ELISA實驗固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等，形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。
目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管選擇何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應的均一性，據此判明其吸附性能。
（2）ELISA實驗包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好，吸附時一般要求pH在9.0-9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響，一般多采用4 ℃18-24 h。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它實驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度，對于多數蛋白質來說通常為1-10μg/ml。
（3）ELISA實驗中酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA實驗法進行初步效價的滴定。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式ELISA實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
（4）ELISA實驗中酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯的顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30 min為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加
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