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美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA檢測試劑(酶聯免疫法)
廣州健侖生物科技有限公司
本公司專業供應各種進口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒,包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢
基孔肯雅熱IgM診斷試劑
基孔肯雅熱IgG診斷試劑
基孔肯雅熱ELISA檢測試劑
基孔肯雅熱快速檢測試劑
基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒(熒光探針PCR)
美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios
德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA
美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA檢測試劑(酶免法)
【預期用途】
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。
【實驗原理】
此試劑盒基于ELISA技術。包被板中包被了抗人IgG抗體,如果人血清或血漿中含有IgG時,則會與其特異性結合,洗板將未結合的物質洗去, 然后加入基孔肯雅抗原溶液,洗板洗去未結合的物質,然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯物。洗板后,加入TMB底物液,顏色變成藍色,加入終止液終止反應,顏色由藍色轉為黃色,zui后用酶標儀在450nm處讀數。
【試劑組成】
包被板:12×8可拆卸,包被了抗人IgG抗體,密封在可重封鋁箔袋中
基孔肯雅溶液1:1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液,即用,白蓋
基孔肯雅溶液2:1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體,即用,藍色,白蓋
基孔肯雅IgM陽性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,紅蓋
基孔肯雅IgM臨界質控:1瓶, 2mL,黃色,即用,綠蓋
基孔肯雅IgM陰性質控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,藍蓋
樣本稀釋液: 1瓶包含100mL的即用緩沖液,用于稀釋樣本,pH7.2±0.2,黃色,白蓋
洗滌液:1瓶,包含50mL 20倍濃縮的緩沖液,(pH7.2±0.2)用于洗板,白蓋
鏈霉親和素結合液:1瓶包含6mL過氧化物酶結合的鏈霉親和素,即用,紅色,黑蓋
TMB底物液:1瓶包含15mL TMB,即用,黃蓋
終止液:1瓶包含15mL,即用,內含硫酸,0.2mol/l,紅蓋
【需要的設備和材料】
固定板
封板片
酶標儀(450/620nm)
37℃孵箱
洗瓶或自動洗板機
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計時器
【儲存和穩定性】
試劑在有效期內,儲存于2-8℃穩定
【試劑準備】
洗滌液的準備
用雙蒸水稀釋洗滌液,例子:10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內有效。
【樣本的采集和準備】
這個實驗中使用的樣本是人血清和血漿,如果實驗在樣本采集后的5天內進行,則需要儲存在2-8℃,否則,必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的,在使用前,則需要充分混勻,避免反復凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本
【樣本的稀釋】
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻,并用漩渦混勻器充分混勻。
【實驗步驟】
在開始試驗前,請仔細閱讀試驗說明。結果的可信度是依賴于嚴格地按照實驗說明來進行的,鋪板時zui少留1個孔為空白對照(A1)1個陰性質控孔(B1)2個臨界質控孔(C1+D1)1個陽性質控孔(E1)。開始試驗前,請將所有試劑都平衡到室溫
1. 吸取50μL的質控品和稀釋過的樣本到相應的孔中,留A1孔做空白對照孔
2. 封板
3. 在37±1℃下孵育1小時±5分鐘
4. 當孵育完成時,揭去封板片,棄去反應液,每孔300μL洗滌液,洗板3次,避免溢出。每孔浸泡的時間都必須>5秒,zui后拍板將殘留的液滴都拍去。
5. 吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板
6. 在室溫孵育30分鐘
7. 重復步驟4
8. 將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結合物混勻10分鐘
9. 吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復合物到除了空白對照孔的每個孔中,蓋板。
10. 室溫孵育30分鐘
11. 重復步驟4
12. 吸取100μL的TMB底物液到每個孔中
13. 避光孵育15分鐘(精確)
14. 加入100μL終止液到每個孔中,與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣
15. 用酶標儀在加入終止液后30分鐘內與450/620nm處檢測
【檢測】
調整酶標儀,以空白對照孔調零,以450nm處檢測所有孔的吸光度值。
【結果】
1. 檢測生效的條件
只有以下條件符合,檢測的結果才能認為的有效的
空白對照孔 吸光度值<0.100
陰性質控孔 吸光度值<臨界質控
臨界質控孔 吸光度值0.150-1.300
陽性質控孔 吸光度值>臨界質控
如果以上條件不符合的,那么試驗結果則是無效的,需要重新檢測
2. 結果的計算
臨界質控平均吸光度值的計算,例子:吸光度1:0.39;吸光度2:0.37
(0.39+0.37)/2=0.38
平均吸光度值為0.38
3. 結果的說明
樣本如果是比臨界值高出10%,則認定為陽性,
樣本如果是在臨界值上下10%之內,則認定為灰色區(推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本,如果樣本仍然是灰色區,可以直接認為是陰性)
樣本如果是比臨界值低出10%,則認定為陰性
4. 結果的單位
病人樣本平均吸光度值×10 = U
臨界值
例子: 1.216×10 =32U
0.38
臨界值: 10 U
灰色區:9-11 U
陰性: <9 U
陽性: >11 U
美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA檢測試劑(酶免法)
基孔肯雅熱
基孔肯雅熱(Chikungunya fever)是一種始發于非洲的病毒性傳染病。1952年,*在坦桑尼亞發現本病流行,1953年分離到基孔肯雅病毒(Chikungunya virus, CHIK-V)。“基孔肯雅”這個名稱音譯自坦桑尼亞的Swahili土語,意思是“屈肢痛”,形容病人因嚴重的關節疼痛而蜷縮著身體的特征體態。這種傳染病主要分布于冬季氣溫18℃以上的非洲及東南亞熱帶及亞熱帶地區。
基孔肯雅熱的潛伏期一般為2天~4天,也可長達7天至12天。其主要癥狀有發熱、關節痛、軀干部皮疹等,可伴有基孔肯雅熱、嘔吐、畏光、結膜充血、腹痛或出血癥狀。
蚊蟲是基孔肯雅熱的主要傳播媒介,包括埃及伊蚊、白紋伊蚊、非洲伊蚊和帶叉-泰氏伊蚊。其中埃及伊蚊為家棲蚊種,是傳播基孔肯雅病毒能力zui強的蚊種;白紋伊蚊是引起近期印度洋島嶼基孔肯雅熱流行的主要媒介,該蚊種在我國分布較為廣泛。
據澳大利亞“新快網”9月29日報道,不少從巴厘島等亞洲景點旅游回國的澳大利亞游客都感染了基孔肯雅病毒,這是由兩種蚊子傳播的病毒,病情嚴重者需要臥床數周時間。據稱,2013年以來感染此病毒的人數呈現爆炸式增長。
據報道,這種病毒僅由兩種蚊子傳播,能導致人體高燒、基孔肯雅熱、皮疹和劇烈的關節及肌肉疼痛,這些癥狀能折磨患者長達一個月時間,部分患者需要臥床或住院數周時間。
澳醫療專家們表示,大多數游客對于東南亞及周邊地區的蚊子危害性意識不足,巴厘島、印度、新加坡和巴布亞新幾內亞是蚊子危害zui嚴重的地區。和瘧疾不同,目前尚無有效對付這種病毒的療法。不過,專門研究蚊子的研究員韋伯表示,只要使用了正確的驅蟲劑,防止蚊蟲叮咬的幾率可增加十倍。
他認為,可靠的驅蟲劑里一般含有避蚊胺或者派卡瑞丁。澳大利亞應該大量進口這種驅蟲劑,以便游客們帶到海外用于防蚊用途。“在澳大利亞有不少人認為驅蟲劑和香水一樣可有可無,但事實上我們應該把它們看成是防曬霜那樣常用的東西。”韋伯說。
但是,在韋伯看來,澳游客往往對政府的防蚊警告置若罔聞。攜帶基孔肯雅病毒的蚊子一般滋生于繁忙的旅游勝地,在城里隨處可見,而不少游客卻以為在郊外才會遇到蚊子。
報道稱,2013年頭9個月里,感染這種病毒的澳人增加至創紀錄的107人,而2011年同期才37人,2012年僅19人。
美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA檢測試劑(酶免法)
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Chikungunya heat
Chikungunya fever is a viral infectious disease originating in Africa. In 1952, the first time in Tanzania found the disease epidemic, in 1953 isolated Chikungunya virus (Chikungunya virus, CHIK-V). "Chikungunya" the name transliteration from Tanzania's Swahili dialect, meaning "limb pain", to describe the patient due to severe joint pain and curled up the body's body. This epidemic is mainly distributed in winter and Southeast Asian tropical and subtropical regions with temperatures above 18 ℃ in winter.
Chikungunya heat incubation period is generally 2 days to 4 days, can also be up to 7 days to 12 days. The main symptoms are fever, joint pain, trunk rash, etc., may be associated with Chikungunya heat, vomiting, photophobia, conjunctival hyperemia, abdominal pain or bleeding symptoms.
Mosquitoes are the main medium of Chikungunya fever, including Aedes aegypti, Aedes albopictus, Aedes aegypti and Aphis gossypii. Among them, Aedes aegypti is a mosquito-borne mosquito, which is the strongest mosquito that spreads Chikungunya virus. Aedes albopictus is the main medium that causes the recent popular Indian Ocean island of Chikungunya. The mosquitoes are distributed in our country widely.
According to the Australian "new fast network" reported on September 29, many tourists from Bali and other Asian tourists return to Australia tourists are infected with the Chikungunya virus, which is transmitted by two mosquitoes virus, serious illness need bed Several weeks time. Allegedly, since 2013 the number of people infected with this virus showed explosive growth.
It is reported that the virus is only transmitted by two mosquitoes, can lead to high fever, Chikungunya heat, rash and severe joint and muscle pain, these symptoms can torture patients for up to a month, some patients need bed or hospital Several weeks time.
Australian residents said that most tourists are not aware of the dangers of mosquitoes in Southeast Asia and the surrounding areas. Bali, India, Singapore and Papua New Guinea are the most seriously affected areas of mosquitoes. Unlike malaria, there is no effective treatment for this virus. However, the study of mosquito researcher Weber said that as long as the use of the correct insect repellent, to prevent mosquito bites can increase the chance of ten times.
He believes that reliable insect repellent usually contains DEET or Pallardine. Australia should import such insect repellents in large quantities so that visitors can be brought overseas for mosquito use. "There are a lot of people in Australia who think of insect repellent and perfume as dispensable, but in fact we should think of them as a common thing like sunscreen." Weber said.
However, in Weber's view, Australian tourists often turn a deaf ear to the government's anti-mosquito warning. The mosquitoes carrying the Chikungunya virus are generally found in the busy tourist attraction, which can be seen everywhere in the city, and many tourists think that mosquitoes will be encountered in the suburbs.
In the first nine months of 2013, the number of Australians infected with the virus increased to a record 107, compared with 37 in 2011 and 19 in 2012.
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