美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA試劑 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌基孔肯雅熱檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、德國NOVA、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱快速檢測試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國的NovaBios

德國CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國NOVA

美國NovaBios基孔肯雅熱ELISA試劑 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

【預期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測試劑盒主要用于定性檢測人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實驗原理】 
此試劑盒基于ELISA技術。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時，則會與其特異性結合，洗板將未結合的物質洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結合的物質，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍色，加入終止液終止反應，顏色由藍色轉為黃色，zui后用酶標儀在450nm處讀數。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽性質控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結合液：1瓶包含6mL過氧化物酶結合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設備和材料】              
固定板
封板片 
酶標儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動洗板機
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計時器 
【儲存和穩定性】 
試劑在有效期內，儲存于2-8℃穩定 
【試劑準備】 
洗滌液的準備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內有效。 
【樣本的采集和準備】 
這個實驗中使用的樣本是人血清和血漿，如果實驗在樣本采集后的5天內進行，則需要儲存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實驗步驟】 
在開始試驗前，請仔細閱讀試驗說明。結果的可信度是依賴于嚴格地按照實驗說明來進行的，鋪板時zui少留1個孔為空白對照（A1）1個陰性質控孔（B1）2個臨界質控孔（C1+D1）1個陽性質控孔（E1）。開始試驗前，請將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質控品和稀釋過的樣本到相應的孔中，留A1孔做空白對照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時±5分鐘 
4.  當孵育完成時，揭去封板片，棄去反應液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復合物到除了空白對照孔的每個孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個孔中，與加TMB底物液時的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標儀在加入終止液后30分鐘內與450/620nm處檢測 
【檢測】 
調整酶標儀，以空白對照孔調零，以450nm處檢測所有孔的吸光度值。 
【結果】 
1.  檢測生效的條件 
只有以下條件符合，檢測的結果才能認為的有效的  
空白對照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質控孔    吸光度值＜臨界質控  
臨界質控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽性質控孔    吸光度值＞臨界質控 
如果以上條件不符合的，那么試驗結果則是無效的，需要重新檢測
2.  結果的計算 
臨界質控平均吸光度值的計算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結果的說明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認定為陽性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內，則認定為灰色區（推薦在2-4周之后再次檢測新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區，可以直接認為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認定為陰性 
4.  結果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽性： ＞11 U

美國NovaBios 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

基孔肯雅熱是一種類似于登革熱的蟲媒傳染病，自去年底在加勒比海區域出現病例后現已蔓延到加勒比海周邊及美國。
本期 Medscape 發表的 CDC 專家評論中，就基孔肯雅與登革熱的鑒別、診斷及管理進行了一一介紹。

病例簡介
在今年 5 月，密蘇里州一位 30 歲出頭的女性前往診所就診，主訴發熱、肌肉痛、關節痛 3 天。她描述了近期曾前往海地，進行為期一周的宣教之旅，并指出自己是在返回后 3 天出現癥狀的。
對她進行了登革熱（DENV）和基孔肯雅（CHIKV）病毒的血清學檢測，囑其臥床休息，并予對乙酰氨基酚止痛。數天后返回的檢驗結果顯示，抗登革熱抗體 IgG 陽性，IgM 陰性，而抗基孔肯雅熱毒抗體 IgG 和 IgM 均為陰性。因此診斷為登革熱，并上報當地衛生部門。
3 周后，患者返院，訴手、腳持續性關節痛。重復登革熱和基孔肯雅熱毒血清學檢測提示，抗 -CHIKV IgM 和 IgG 抗體均為陽性，而抗 -DENV IgG 和 IgM 抗體均為陰性。考慮到需進行疼痛管理，患者被轉診至風濕病專家進行咨詢。
登革熱和基孔肯雅熱的診斷
臨床醫生在評估急性發熱性疾病的患者時，需要收集患者的旅游史。如果患者曾前往熱帶的任何地區旅行，尤其是近期出現基孔肯雅的加勒比海和美國地區，鑒別診斷一定要想到基孔肯雅熱和登革熱。
基孔肯雅熱和登革熱都是急性發熱性疾病，以發熱、肌痛、嗜睡為特征。部分患者可能還會出現斑丘疹、基孔肯雅熱、嘔吐和頭痛。
基孔肯雅熱的特征表現是使人衰弱的雙側多發關節痛，以及一些病例中可出現關節炎。
盡管這些癥狀和體征可幫助鑒別登革熱和基孔肯雅熱，臨床醫生對于急性發熱性疾病且近期有熱帶地區旅游史的患者進行鑒別診斷時，應同時考慮到這兩種疾病。此外還應對這些患者進行其他疾病的評估，包括瘧疾、細螺旋體病和其他細菌感染。

美國提高對登革熱和基孔肯雅熱的重視
基孔肯雅熱病毒于 2013 年末進入加勒比海地區。直至 2014 年 9 月 5 日，加勒比海地區和美國一共報告了超過 65 萬臨床病例。其中包括超過 750 例的旅行相關病例，患者在境外感染，返回美國后發病。基孔肯雅的輸入導致佛羅里達州至少出現 8 例當地獲得基孔肯雅熱染的病例。
因為在加勒比海所有基孔肯雅流行的地區均有登革熱的流行，而美國正在經歷基孔肯雅的爆發，因此對從這些地區返回出現急性發熱性疾病的患者，對其鑒別診斷應同時包括登革熱和基孔肯雅熱。
對疑似基孔肯雅熱和登革熱病例的診斷實驗
在起病的前 5 天，應對疑似病例的血清進行 RT-PCR 檢測，以直接檢測 CHIKV 或 DENV 核酸。出現癥狀 5 天或更長時間后收集到的血清樣本則可通過免疫分析檢測抗 -CHIKV 和抗 -DENV IgM 抗體。
若zui初的結果是陰性，但仍懷疑登革熱或基孔肯雅熱，應在起病 7 天或更長時間后再次收集恢復期血清，重新檢測 IgM 抗體。

美國NovaBios 基孔肯雅熱ELISA檢測試劑

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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Chikungunya fever is an infectious disease similar to dengue fever, which has spread to the Caribbean and the United States since the end of last year in the Caribbean region.
Medscape published in the current CDC expert commentary on the identification of Chikungunya and dengue fever, diagnosis and management were introduced.

Case brief
In May this year, a 30-year-old Missouri woman went to the clinic for treatment, fever, muscle pain, joint pain for 3 days. She described the recent trip to Haiti for a week-long mission tour and pointed out that he was symptomatic three days after the return.
(DENV) and Chikungunya (CHIKV) virus serological tests, told their bed rest, and to acetaminophen pain. A few days later returned to the test results showed that anti-dengue fever antibody IgG positive, IgM negative, and anti-cardinal Kanya heat antibody IgG and IgM were negative. So the diagnosis of dengue fever, and reported to the local health sector.
3 weeks later, the patient returned to hospital, hand, foot joint pain. Repeated dengue fever and Chikungunya fever test showed that anti-CHIKV IgM and IgG antibodies were positive, while anti-DENV IgG and IgM antibodies were negative. Taking into account the need for pain management, patients were referred to rheumatologists to consult.
Diagnosis of dengue fever and chikungunya fever
Clinicians need to collect patient travel history when assessing patients with acute febrile disease. If the patient travels to any area of ??the tropics, especially in the recent Caribbean and American areas of Chikungunya, the differential diagnosis must be considered for Chikungunya fever and dengue fever.
Chikungunya fever and dengue fever are acute febrile diseases characterized by fever, myalgia and drowsiness. Some patients may also have spotted pimples, chikungunya fever, vomiting and headache.
Chikungunya heat characteristics of the performance of the people are weak bilateral joint pain, and some cases can occur in arthritis.
Although these symptoms and signs can help identify dengue and Chikungunya fever, clinicians should also consider these two diseases when diagnosing patients with acute febrile diseases and recent tropical history of travel. In addition, these patients should be evaluated for other diseases, including malaria, leptospirosis and other bacterial infections.

The United States has increased attention to dengue and Chikungunya
Chikungunya fever virus entered the Caribbean at the end of 2013. Until September 5, 2014, the Caribbean and the United States reported a total of more than 650,000 clinical cases. Which includes more than 750 cases of travel-related cases, patients infected outside the United States after the onset of the disease. Chikungunya's input led to at least 8 cases of local access to Chikungunya fever in Florida.
Because there are dengue epidemic in all areas of the Chikungunya epidemic in the Caribbean, and the United States is experiencing the outbreak of Chikungunya, the differential diagnosis of patients with acute febrile diseases from these areas should include both Dengue and Chikungunya heat.
Diagnostic test of suspected cases of chikungunya fever and dengue fever
In the first 5 days of onset, serum of suspected cases should be subjected to RT-PCR for direct detection of CHIKV or DENV nucleic acids. The serum samples collected after 5 days or more of the symptoms can be tested for anti-CHIKV and anti-DENV IgM antibodies by immunoassay.
If the initial result is negative, but still suspected dengue or Chikungunya heat, should be in the onset of 7 days or more after the recovery of serum recovery, re-detection of IgM antibodies.