美國NovaBios黃熱病快速檢測卡（膠體金法）

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

黃熱病毒IgM、IgG、ELISA檢測試劑、黃熱病快速檢測試劑盒、

黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios黃熱病快速檢測卡（膠體金法）

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖。可以從標準曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios

2016年20日新增的這名患者，系在安哥拉務工人員，出國前未接種黃熱病疫苗。患者2016年3月6日（北京時間）在安哥拉出現發熱、全身不適等癥狀，曾在當地多家醫院診治，3月18日晚抵達北京首都機場。患者歸國途中，其親友已將患者患病及航班信息通報出入境檢驗檢疫部門。患者抵達北京后，出入境檢驗檢疫部門即對其進行篩查，發現其尿液標本黃熱病核酸陽性。2016年3月19日，患者轉入醫院住院隔離治療。2016年3月20日，北京市疾病預防控制中心對患者標本復核結果為黃熱病核酸陽性。患者病情較重，正接受治療。
上海
2016年3月18日，上海市衛生和計劃生育委員會通報，上海市報告一例境外輸入性外來就診黃熱病確診病例。
患者為男性，46歲，江蘇省人，勞務輸出至非洲安哥拉首都羅安達工作。患者于2016年3月5日(北京時間)在羅安達出現發熱，2016年3月6日乘飛機經迪拜轉機，于2016年3月7日21時抵達上海，入境時紅外線測溫結果體溫正常。入境后直接主動到醫院就診。2016年3月14日，上海市疾病預防控制中心檢測患者標本為黃熱病毒核酸初篩陽性，立即將標本送中國疾病預防控制中心復核檢測。2016年3月17日中國疾病預防控制中心報告黃熱病毒核酸檢測結果陽性。隨后，上海市衛生計生委根據患者流行病學史、臨床表現和中國疾病預防控制中心對患者標本的復核檢測結果，確診該病例為輸入性黃熱病病例。目前，患者出現肝功能損害，但總體病情穩定，正在積極治療中。黃熱病
福建
2016年3月24日，福建省衛生和計劃生育委員會晚間通報，當天確診1例輸入性黃熱病病例。
確診患者為一名42歲福清市女子，長期在安哥拉羅安達經商，出國前未接種黃熱病疫苗。2016年3月11日(北京時間)她出現發熱、寒戰、關節疼痛等癥狀，而此前數日她曾在羅安達當地醫院注射黃熱病疫苗。該患者3月12日經北京首都機場入境，紅外線測溫結果尚顯體溫正常，隔日到福州市傳染病醫院就診。2016年3月18日，福建省疾病預防控制中心對其標本檢測顯示黃熱病毒核酸初篩陽性。該患者正進行防蚊隔離治療，無發熱，精神狀態尚可。黃熱病
2016年4月1日，福建省新增3例輸入性黃熱病病例。3名患者均在安哥拉羅安達經商。
患者范某，男，42歲，福建省三明市大田縣人，長期在安哥拉羅安達經商。患者于2016年3月17日在安哥拉出現發熱等癥狀，在當地某醫院診治，癥狀未緩解。18日，乘飛機經埃塞俄比亞于北京時間19日到達上海浦東機場(因上飛機時服用退熱藥，體溫正常)，當晚抵達福州市。現收治在福州市某醫院。
患者鄭某，女，36歲，福建省福州市福清市人，長期在安哥拉羅安達經商。患者于2016年3月15日在安哥拉出現發熱癥狀，自行服用退熱藥，體溫恢復正常。20日，乘飛機經埃塞俄比亞于北京時間21日到達上海浦東機場，當晚抵達福州市。現收治在福州市某醫院。

美國NovaBios

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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2016 years 20 new this patient, the Department of workers in Angola, before going abroad did not receive yellow fever vaccine. Patients March 26, 2016 (Beijing time) in Angola fever, general malaise and other symptoms, had a number of local hospital diagnosis and treatment, arrived on the evening of March 18 Beijing Capital Airport. Patients return to the country, their relatives and friends have sick and flight information reported to the entry and exit inspection and quarantine departments. After the arrival of the patient in Beijing, the entry and exit inspection and quarantine departments to its screening and found that the urine samples of yellow fever nucleic acid positive. On March 19, 2016, patients were transferred to hospital for hospitalization. March 20, 2016, the Beijing Municipal Center for Disease Control and Prevention on the patient specimens review results for yellow fever nucleic acid positive. The patient is in serious condition and is being treated.
Shanghai
On March 18, 2016, the Shanghai Municipal Health and Family Planning Commission informed that Shanghai reported a case of imported foreign fever diagnosed with yellow fever.
The patient is male, 46 years old, Jiangsu Province, labor exports to the African capital of Luanda, Angola. Patients on March 5, 2016 (Beijing time) in Luanda fever, March 6, 2016 by plane by Dubai, arrived at 21 o'clock on March 7, 2016 arrived in Shanghai, the inflow of infrared temperature results at normal temperature The After entering the hospital directly to the hospital. March 14, 2016, Shanghai Municipal Center for Disease Control and Prevention test specimens for the yellow fever virus nucleic acid screening positive, immediay sent to the Chinese Center for Disease Control and Prevention specimens review. March 17, 2016 China Center for Disease Control and Prevention reported that yellow fever virus nucleic acid test results were positive. Subsequently, the Shanghai Municipal Health Commission in accordance with the history of patients with epidemiology, clinical manifestations and the Chinese Center for Disease Control and Prevention of patients with the results of the examination of specimens, confirmed the case of imported cases of yellow fever. At present, patients with liver damage, but the overall condition is stable, is actively in the treatment. Yellow fever
Fujian
March 24, 2016, Fujian Provincial Health and Family Planning Commission evening notification, the day confirmed 1 case of imported yellow fever cases.
Confirmed a patient for a 42-year-old Fuqing City woman, long-term business in Luanda, Angola, before going abroad did not receive yellow fever vaccine. March 11, 2016 (Beijing time) she appeared fever, chills, joint pain and other symptoms, and after a few days she was in Luanda local hospital injection of yellow fever vaccine. The patient on March 12 by the Beijing Capital International Airport entry, infrared temperature measurement results are still normal temperature, the next day to Fuzhou infectious disease hospital. March 18, 2016, Fujian Provincial Center for Disease Control and Prevention of its specimens showed yellow fever virus nucleic acid screening positive. The patient is being anti-mosquito isolation treatment, no fever, mental state is acceptable. Yellow fever
April 1, 2016, Fujian Province, 3 cases of imported cases of yellow fever. Three patients were doing business in Luanda, Angola.
Patients Fanmou, male, 42 years old, Sanming City, Fujian Province Daejeon County, long-term business in Angola Luanda. Patients in March 17, 2016 in Angola fever and other symptoms, in a local hospital for treatment, the symptoms did not ease. 18, by plane by Ethiopia in Beijing on the 19th arrived in Shanghai Pudong Airport (due to the plane when taking antipyretics, normal temperature), arrived in Fuzhou that night. Is now treated in a hospital in Fuzhou.
Patients Jeong, female, 36 years old, Fuzhou, Fujian Province Fuqing City, long-term business in Luanda, Angola. Patients on March 15, 2016 in Angola fever symptoms, self-taking antipyretics, body temperature returned to normal. 20, by plane by Ethiopia in Beijing on the 21st arrived in Shanghai Pudong Airport, arrived in Fuzhou that night. Is now treated in a hospital in Fuzhou.