美國NovaBios美國進口黃熱病抗體IgG/IgM診斷試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

黃熱病毒IgM、IgG、ELISA檢測試劑、黃熱病快速檢測試劑盒、

黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios美國進口黃熱病抗體IgG/IgM診斷試劑盒

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖。可以從標準曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios美國進口

市衛計委稱，將進一步落實各項防控措施，做好流行病學調查、蚊媒應急監測、健康教育等工作。
　　北京市衛計委提醒廣大市民，近期確需前往安哥拉等國家和地區，請務必按規定提前接種黃熱病疫苗。
　　*通報
　　北京兩例輸入性黃熱病新增病例
　　患者楊某，男，44歲，福建省福清市人，為在安哥拉務工人員，出國前未接種黃熱病疫苗。患者于3月9日（北京時間）下午在安哥拉出現發熱等癥狀，3月15日乘飛機經迪拜轉機，3月16日晚抵達北京首都機場。患者主動自行前往醫院住院治療。
　　患者陳某，男，44歲，四川省廣元市人，為在安哥拉務工人員，出國前未接種黃熱病疫苗。患者3月11日（北京時間）于安哥拉出現發熱、全身不適等癥狀，3月17日患者乘飛機經迪拜轉機，17日晚抵達北京首都機場，入境時因體溫高，經檢疫人員初步調查后，由120救護車轉送至醫院住院治療。
　　提醒
　　接種一劑疫苗可持久免疫保護
　　北京市疾控專家稱，黃熱病可以通過接種黃熱病疫苗進行預防。通常黃熱病疫苗為減毒黃熱病毒17D株制備的疫苗，可以有效預防黃熱病毒感染。抗體一般于接種后7-10天出現。因此，建議準備前往有黃熱病流行的國家和地區的人員提前接種疫苗，防止在境外感染黃熱病。
　　對于多次往返國內外的務工者，黃熱病疫苗需要反復接種嗎？專家介紹，對于大多數旅行者來說，接種1劑足以提供持久的免疫保護，甚至產生終身保護，無需加強免疫。
　　市衛計委建議，居民出境前要詳細了解目的地國家的傳染病疫情狀況，前往疫區國家和地區的人員將會面臨感染黃熱病毒的風險，應積極做好黃熱病預防，做好個人防護，采取驅蚊劑、長袖衣物等防蚊措施，避免蚊蟲叮咬。
　　此外，無論在境外疫區或從疫區國家和地區返回的旅行者，一旦出現可疑癥狀，應及時就診并主動告知醫生旅行史，以便及時得到診斷和治療。
 國家衛生和計劃生育委員會3月13日通報，國家衛生計生委組織專家確診一例輸入性黃熱病病例。
患者，男，32歲，浙江省人，常年在安哥拉首都羅安達(近期發生黃熱病疫情)做生意。患者于3月8日(北京時間)在羅安達出現發熱，體溫zui高39.3℃，伴畏寒等癥狀，于3月9日乘飛機經迪拜轉機，3月10日凌晨2時抵達北京，直接主動到醫院就診。3月11日，北京市疾控中心檢測患者標本為核酸初篩陽性，當晚將標本送中國疾控中心復核檢測。3月12日，中國疾控中心報告核酸檢測結果陽性。隨后，國家衛生計生委組織專家組根據患者流行病學史、臨床表現和中國疾控中心對患者標本的復核檢測結果，確診該病例為我國*輸入性黃熱病病例。目前，患者出現肝腎功能損害，病情較重，正在積極救治中。
北京市衛生計生部門會同中國疾控中心組織專家對輸入病例帶來的傳播風險進行了評估。專家們認為，黃熱病屬于蚊媒傳播疾病，主要通過埃及伊蚊叮咬感染；北京市無埃及伊蚊且不屬于我國伊蚊主要分布地區，目前北京氣溫低，未進入蚊媒活躍期。因此，此次輸入病例引發傳播并進一步擴散的風險極低。

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我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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Municipal Health Commission said that it will further implement the prevention and control measures, do epidemiological investigation, mosquito vector emergency monitoring, health education and so on.
Beijing Municipal Health Commission reminded the general public, the recent need to travel to Angola and other countries and regions, be sure to advance in accordance with the provisions of inoculation of yellow fever vaccine.
Official notification
Two cases of imported yellow fever in Beijing
Patients Yang, male, 44 years old, Fuqing City, Fujian Province, for the workers in Angola, before going abroad to receive vaccination against yellow fever. Patients on March 9 (Beijing time) afternoon in Angola fever and other symptoms, March 15 by plane by Dubai, March 16 evening arrived in Beijing Capital Airport. Patients take the initiative to go to hospital for treatment.
Patient Chen, male, 44 years old, Guangyuan City, Sichuan Province, for the workers in Angola, before leaving the country did not receive yellow fever vaccine. Patients on March 11 (Beijing time) in Angola fever, general malaise and other symptoms, March 17 patients by plane by Dubai, 17 evening arrived in Beijing Capital Airport, due to high temperature, the quarantine officers after the initial investigation , Transferred from the 120 ambulance to hospital hospital treatment.
Reminder
Vaccination of one dose of vaccine for sustainable immunization
Beijing disease control experts said that yellow fever can be vaccinated by yellow fever vaccine for prevention. Usually yellow fever vaccine for attenuated yellow fever virus 17D strains prepared by the vaccine, can effectively prevent yellow fever virus infection. Antibodies are generally present 7-10 days after inoculation. Therefore, it is recommended to go to people with yellow fever epidemic in countries and regions in advance vaccination, to prevent infection outside the yellow fever.
For many migrant workers at home and abroad, yellow fever vaccine need to re-vaccination? Experts say that for most travelers, vaccination is sufficient to provide lasting immunization, or even lifetime protection, without the need for enhanced immunization.
City Health Commission recommended that residents before going out to learn more about the destination countries of the epidemic situation of infectious diseases, to the epidemic area countries and regions will face the risk of infection with yellow fever, should actively do a good job of yellow fever prevention, do a good job Personal protection, take mosquito repellent, long-sleeved clothing and other anti-mosquito measures to avoid mosquito bites.
In addition, regardless of the epidemic area in the country or from the affected countries and regions returned to the traveler, in the event of suspicious symptoms, should be timely treatment and take the initiative to inform the doctor travel history, in order to timely diagnosis and treatment.
 National Health and Family Planning Commission on March 13 informed the National Health and Health Committee organized an expert diagnosis of imported cases of yellow fever.
Patients, male, 32 years old, Zhejiang Province, perennial in the Angolan capital Luanda (recent yellow fever epidemic) to do business. Patients on March 8 (Beijing time) in Luanda fever, body temperature up to 39.3 ℃, with chills and other symptoms, on March 9 by plane by Dubai, March 10 at 2 am arrived in Beijing, direct initiative To the hospital. March 11, Beijing CDC test specimens were positive for nucleic acid screening, the night will send samples to China CDC review. On March 12, China CDC reported positive results of nucleic acid detection. Subsequently, the National Health and Health Committee organized the expert group based on the history of patients with epidemiology, clinical manifestations and the Chinese CDC on the patient specimens of the review results, confirmed the case for the first case of imported yellow fever in China. At present, patients with liver and kidney function damage, the condition is heavier, is actively in the treatment.
Beijing Health and Family Planning Department in conjunction with the China CDC organizes experts to assess the risk of transmission of imported cases. Experts believe that yellow fever is mosquito-borne diseases, mainly through the Egyptian aede bite infection; Beijing Aede Aedes do not belong to the main distribution area of ??Aedes mosquito, the current low temperature in Beijing, did not enter the mosquito active period. As a result, the risk of transmission and further spread is low.