美國(guó)NovaBios黃熱病病毒檢測(cè)試劑盒（安哥拉）

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌黃熱病檢測(cè)試劑盒，包括美國(guó)的NovaBios、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

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美國(guó)CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios

美國(guó)NovaBios黃熱病病毒檢測(cè)試劑盒（安哥拉）

【黃熱病簡(jiǎn)介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數(shù)情況下，癥狀包括發(fā)熱，寒戰(zhàn)，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內(nèi)改善。在一些人在一天內(nèi)改善，發(fā)燒回來(lái)，腹痛發(fā)生，肝損傷開始導(dǎo)致黃色皮膚。如果發(fā)生這種情況，出血和腎臟問(wèn)題的風(fēng)險(xiǎn)也增加。

【檢測(cè)原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對(duì)照或測(cè)試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測(cè)試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現(xiàn)HRP酶反應(yīng)。TMB由HRP催化以產(chǎn)生在加入酸性停止溶液后變?yōu)辄S色的藍(lán)色產(chǎn)物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數(shù)器中在450nm下通過(guò)分光亮度計(jì)測(cè)量吸亮度，然后可以計(jì)算YFV-IgM/IgG的濃度。

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒
檢測(cè)范圍：定性
靈敏度：定性
儲(chǔ)存和使用期：2-8℃ 儲(chǔ)存12個(gè)月
產(chǎn)品應(yīng)用：用于定性檢測(cè)人血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個(gè)96孔板預(yù)涂
2.陽(yáng)性對(duì)照：0.5ml
3.陰性對(duì)照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯(lián)試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養(yǎng)箱
2.酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動(dòng)洗板機(jī)
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測(cè)試樣品（2小時(shí)內(nèi)）后立即分離。或等分并長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-20°C。避免多個(gè)凍融循環(huán)。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲(chǔ)存于-20℃。
血清：在室溫下凝結(jié)血清（約4小時(shí)）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲(chǔ)存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi)以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
尿：在無(wú)菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對(duì)細(xì)胞懸浮液進(jìn)行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測(cè)定或等分并儲(chǔ)存在-80℃。
（注意：1.*凝結(jié)血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗(yàn)樣品防腐劑，因?yàn)樗种艸RP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測(cè)定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個(gè)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置陽(yáng)性/陰性，測(cè)試樣品和對(duì)照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽(yáng)性對(duì)照等分到設(shè)定的孔中。
3.向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測(cè)試樣品孔中加入50μl適當(dāng)稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側(cè)壁。搖動(dòng)平板以混合內(nèi)容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過(guò)在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來(lái)丟棄板內(nèi)容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時(shí)候*干燥。
手動(dòng)清洗：丟棄溶液，不要接觸側(cè)壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個(gè)孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內(nèi)容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動(dòng)洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過(guò)量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉(zhuǎn)該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設(shè)置為1分鐘的浸泡時(shí)間。
8.向每個(gè)孔中加入50μlHRP結(jié)合物的試劑（對(duì)照孔除外）。在每個(gè)孔底部加入溶液，不要接觸側(cè)壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個(gè)孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個(gè)孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應(yīng)立即變?yōu)辄S色。
13.閱讀O.D.在微板讀數(shù)器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內(nèi)。對(duì)于計(jì)算，（相對(duì)O.D.450）=（每個(gè)孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以作為每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對(duì)O.D.450與標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的相應(yīng)濃度作圖。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數(shù)乘以內(nèi)插法得到稀釋前的濃度。

C.結(jié)果確定
1.試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照的平均值≥1.00; 陰性對(duì)照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=負(fù)控制的平均值+0.15
3.陰性結(jié)果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽(yáng)性結(jié)果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽(yáng)性。

D.注意事項(xiàng)
1.在實(shí)驗(yàn)之前，離心每個(gè)試劑盒組分?jǐn)?shù)分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時(shí)避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結(jié)晶并分離。如果發(fā)生這種情況，請(qǐng)加熱管以溶解。
4.建議每個(gè)對(duì)照和樣品一式兩份或重復(fù)測(cè)量三次。
5.不要讓板在任何時(shí)候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復(fù)使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過(guò)期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲(chǔ)存在黑暗中，并且為了避免板溫育對(duì)于溫度差的邊緣效應(yīng)，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國(guó)NovaBios

目前，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委正積極指導(dǎo)北京市衛(wèi)生計(jì)生委按照相關(guān)診療方案和防控要求，全力救治患者，落實(shí)各項(xiàng)防控措施。北京市衛(wèi)生計(jì)生部門正按照我委要求，進(jìn)一步做好病例治療、流行病學(xué)調(diào)查，蚊媒應(yīng)急監(jiān)測(cè)、愛(ài)國(guó)衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)、健康教育等工作。
該病例有關(guān)情況已及時(shí)向世界衛(wèi)生組織、中國(guó)香港特區(qū)通報(bào)。
黃熱病癥狀
早期癥狀： 急起高熱伴有寒戰(zhàn)、劇烈頭痛及全身痛，明顯乏力、食欲不振、黃熱病、嘔吐、腹瀉或便秘等。患者煩躁不安，結(jié)膜充血，面、頸潮紅。
晚期癥狀： 肝、腎、心血管功能損害以及出血癥狀
相關(guān)癥狀： 煩躁不安 黃熱病 高熱 食欲不振 齒齦出血 肌痛
一、癥狀
潛伏期3～6天。多數(shù)受染者癥狀較輕，可僅表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、輕度蛋白尿等，持續(xù)數(shù)日即恢復(fù)。黃熱病根據(jù)病情輕重，可分為極輕型、輕型、重型和惡性型。極輕型和輕型僅靠臨床難以作出診斷，因其發(fā)熱，頭痛，肌痛僅持續(xù)1～2天自愈，難以與流感，登革熱等相鑒別，只有依靠病原學(xué)或血清學(xué)試驗(yàn)方能證實(shí)。這兩型病例數(shù)多，易忽略，是流行病學(xué)上的重要傳染源。重型患者只發(fā)生在約15%的病例。病程經(jīng)過(guò)可分為4期。
1、感染期(病毒血癥期)
急起高熱，可達(dá)40℃以上，可伴畏寒或寒顫、劇烈頭痛、背痛、腿痛和全身衰竭、眼部充血、鼻衄、黃熱病嘔吐，舌尖及舌緣鮮紅，中央有苔，相對(duì)緩脈，上腹不適，壓痛明顯。隨病情逐漸加重，病人煩躁不安，第3天出現(xiàn)黃疸，第4天出現(xiàn)蛋白尿。血白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例下降。本期持續(xù)3～4天。
2.緩解期
發(fā)熱部分或*消退，癥狀緩解，持續(xù)數(shù)小時(shí)至24h。
3.中毒期
 (器官損傷期) 病毒血癥期后，病程第4天左右，病人癥狀可出現(xiàn)短暫的緩解，體溫降低，癥狀改善。但幾小時(shí)～24小時(shí)后癥狀再度出現(xiàn)并加重， 表現(xiàn)為熱度上升，心率減慢，心音低鈍，血壓降低，黃疸加深，尿蛋白量增多，頻繁嘔吐，上腹痛更明顯。各種出血征象相繼出現(xiàn)，如牙齦出血，鼻衄，皮膚瘀斑，嘔血，黑糞，血尿，子宮出血等。如出現(xiàn)頻繁呃逆或嘔吐鮮血，黑便，昏迷，譫妄，無(wú)尿等，均為病情轉(zhuǎn)危的先兆，常于第7～9天內(nèi)死亡，偶見暴發(fā)型病例在病程第2-3天死亡，而無(wú)明顯肝腎損害。 該期一般3～4天，少數(shù)病例可延長(zhǎng)至2周以上。
4.恢復(fù)期
體溫下降至正常。癥狀和蛋白尿逐漸消黃熱病，但乏力可持續(xù)1～2周或更久。此期仍需密切觀察心臟情況，個(gè)別病例可因心律不齊或心功能衰竭死亡。存活病例一般無(wú)后遺癥。

美國(guó)NovaBios

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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【市場(chǎng)部】    楊永漢

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At present, the National Health and Family Planning Commission is actively guiding the Beijing Municipal Health Commission in accordance with the relevant treatment programs and prevention and control requirements, to treat patients, the implementation of the prevention and control measures. Beijing health care department is in accordance with the requirements of our committee, to further do a good job in case treatment, epidemiological investigation, mosquito vector emergency monitoring, patriotic health movement, health education and so on.
The case has been promptly informed to the World Health Organization, China Hong Kong SAR.
Symptoms of yellow fever
Early symptoms: acute high fever accompanied by chills, severe headache and body pain, obvious fatigue, loss of appetite, yellow fever, vomiting, diarrhea or constipation. Patients with irritability, conjunctival hyperemia, face, neck flushing.
Late symptoms: liver, kidney, cardiovascular damage and bleeding symptoms
Relevant symptoms: irritability yellow fever high fever appetite bloody bleeding myalgia
First, the symptoms
Incubation period of 3 to 6 days. Most of the infected people mild symptoms, can only show fever, headache, mild proteinuria, etc., for several days to recover. Yellow fever according to the severity of the disease can be divided into very light, light, heavy and malignant type. Very light and light clinical difficult to make a diagnosis alone, because of fever, headache, myalgia only 1 to 2 days self-healing, difficult to distinguish with influenza, dengue fever, etc., only rely on pathogen or serology test can be confirmed. The number of these two types of cases, easy to ignore, is an important epidemiological source of infection. Severe patients only occur in about 15% of cases. The course of the disease can be divided into four periods.
1, infection (viremia)
Rapid onset, up to 40 ℃ or more, may be accompanied by chills or chills, severe headache, back pain, leg pain and systemic failure, eye congestion, epistaxis, yellow fever, vomiting, tongue and tongue bright red, , Relatively slow pulse, epigastric discomfort, tenderness significantly. With the disease gradually increased, the patient irritability, the first three days of jaundice, the first 4 days of proteinuria. The total number of white blood cells and the proportion of neutrophils decreased. This period lasts 3 to 4 days.
2. Remission period
Fever partial or complete regression, symptom relief, lasted several hours to 24h
3. poisoning period
 (Organ injury period) after viremia, the course of about 4 days, the patient symptoms can be a short remission, lower body temperature, symptoms improved. But after a few hours to 24 hours after the symptoms re-emergence and increase, the performance of the heat rise, heart rate, heart sounds low, blood pressure, jaundice deepened, increased urine protein, frequent vomiting, upper abdominal pain is more obvious. A variety of signs of bleeding have emerged, such as gum bleeding, epistaxis, skin ecchymosis, hematemesis, black manure, hematuria, uterine bleeding and so on. Such as the occurrence of frequent hiccups or vomiting blood, melena, coma, delirium, anuria, etc., are the threat of disease progression, often died in 7 to 9 days, occasionally fulminant cases died in the second day of the course, And no obvious liver and kidney damage. The period is generally 3 to 4 days, a few cases can be extended to more than 2 weeks.
4. recovery period
Body temperature dropped to normal. Symptoms and proteinuria gradually yellow fever, but the fatigue can last 1 to 2 weeks or more. This period still need to closely observe the heart, individual cases may be due to arrhythmia or heart failure death. Survival cases are generally no sequelae.