美國(guó)NovaBios 黃熱病ELISA試劑 黃熱病ELISA檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌黃熱病檢測(cè)試劑盒，包括美國(guó)的NovaBios、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

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美國(guó)NovaBios 黃熱病ELISA試劑 黃熱病ELISA檢測(cè)試劑盒

【黃熱病簡(jiǎn)介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數(shù)情況下，癥狀包括發(fā)熱，寒戰(zhàn)，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內(nèi)改善。在一些人在一天內(nèi)改善，發(fā)燒回來(lái)，腹痛發(fā)生，肝損傷開始導(dǎo)致黃色皮膚。如果發(fā)生這種情況，出血和腎臟問題的風(fēng)險(xiǎn)也增加。

【檢測(cè)原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對(duì)照或測(cè)試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測(cè)試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現(xiàn)HRP酶反應(yīng)。TMB由HRP催化以產(chǎn)生在加入酸性停止溶液后變?yōu)辄S色的藍(lán)色產(chǎn)物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數(shù)器中在450nm下通過分光亮度計(jì)測(cè)量吸亮度，然后可以計(jì)算YFV-IgM/IgG的濃度。

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒
檢測(cè)范圍：定性
靈敏度：定性
儲(chǔ)存和使用期：2-8℃ 儲(chǔ)存12個(gè)月
產(chǎn)品應(yīng)用：用于定性檢測(cè)人血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個(gè)96孔板預(yù)涂
2.陽(yáng)性對(duì)照：0.5ml
3.陰性對(duì)照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯(lián)試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養(yǎng)箱
2.酶標(biāo)儀（波長(zhǎng)：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動(dòng)洗板機(jī)
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測(cè)試樣品（2小時(shí)內(nèi)）后立即分離。或等分并長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-20°C。避免多個(gè)凍融循環(huán)。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲(chǔ)存于-20℃。
血清：在室溫下凝結(jié)血清（約4小時(shí)）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲(chǔ)存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi)以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
尿：在無(wú)菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲(chǔ)在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對(duì)細(xì)胞懸浮液進(jìn)行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測(cè)定或等分并儲(chǔ)存在-80℃。
（注意：1.*凝結(jié)血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗(yàn)樣品防腐劑，因?yàn)樗种艸RP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測(cè)定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個(gè)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置陽(yáng)性/陰性，測(cè)試樣品和對(duì)照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽(yáng)性對(duì)照等分到設(shè)定的孔中。
3.向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測(cè)試樣品孔中加入50μl適當(dāng)稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側(cè)壁。搖動(dòng)平板以混合內(nèi)容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來(lái)丟棄板內(nèi)容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時(shí)候*干燥。
手動(dòng)清洗：丟棄溶液，不要接觸側(cè)壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個(gè)孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內(nèi)容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動(dòng)洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉(zhuǎn)該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設(shè)置為1分鐘的浸泡時(shí)間。
8.向每個(gè)孔中加入50μlHRP結(jié)合物的試劑（對(duì)照孔除外）。在每個(gè)孔底部加入溶液，不要接觸側(cè)壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個(gè)孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個(gè)孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應(yīng)立即變?yōu)辄S色。
13.閱讀O.D.在微板讀數(shù)器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內(nèi)。對(duì)于計(jì)算，（相對(duì)O.D.450）=（每個(gè)孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以作為每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對(duì)O.D.450與標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的相應(yīng)濃度作圖。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數(shù)乘以內(nèi)插法得到稀釋前的濃度。

C.結(jié)果確定
1.試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照的平均值≥1.00; 陰性對(duì)照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=負(fù)控制的平均值+0.15
3.陰性結(jié)果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽(yáng)性結(jié)果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽(yáng)性。

D.注意事項(xiàng)
1.在實(shí)驗(yàn)之前，離心每個(gè)試劑盒組分?jǐn)?shù)分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時(shí)避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結(jié)晶并分離。如果發(fā)生這種情況，請(qǐng)加熱管以溶解。
4.建議每個(gè)對(duì)照和樣品一式兩份或重復(fù)測(cè)量三次。
5.不要讓板在任何時(shí)候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復(fù)使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲(chǔ)存在黑暗中，并且為了避免板溫育對(duì)于溫度差的邊緣效應(yīng)，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

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七、治療
　　本病無(wú)*藥物治療，主要為對(duì)癥支持治療。
　　（一）一般治療。
　　急性期病人應(yīng)臥床休息，就地治療，防止感染擴(kuò)散。對(duì)病人應(yīng)進(jìn)行精心護(hù)理和對(duì)癥治療。
　　（二）對(duì)癥治療。
　　營(yíng)養(yǎng)支持；補(bǔ)液，維持水、電解質(zhì)和酸堿平衡；預(yù)防和治療出血、低血壓休克；預(yù)防和治療肝、腎功能衰竭和繼發(fā)感染等各種并發(fā)癥。
　　八、預(yù)后
　　感染后出現(xiàn)臨床癥狀的約占5-20％，輕型感染后可自行*，少數(shù)病人病情嚴(yán)重終至死亡。新進(jìn)入疫區(qū)的外來(lái)人口病死率高達(dá)30-40%。少有后遺癥。
　　九、預(yù)防
　　（一）控制傳染源。
　　對(duì)疑似和確診病例應(yīng)隔離治療。患者在病毒血癥期間，應(yīng)予以防蚊隔離。對(duì)來(lái)自黃熱病疫區(qū)人員實(shí)施衛(wèi)生檢疫。
　　（二）切斷傳播途徑。
　　防蚊滅蚊是防止本病的重要措施。
　　（三）保護(hù)易感人群。
　　前往黃熱疫區(qū)人員應(yīng)接種黃熱減毒疫苗。在黃熱疫區(qū)應(yīng)采取個(gè)人防蚊措施。
黃熱病
Mark D. Gershman，J. Erin Staples
感染代理
黃熱病毒（YFV）是屬于黃病毒屬的單鏈RNA病毒。
傳輸
傳染媒介傳播通過感染的蚊子，主要是艾滋病或海鰻屬的叮咬發(fā)生。非人類和人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物是病毒的主要水庫(kù)，伴隨著人類傳播（人與人之間的傳播）。黃熱病有3個(gè)傳播周期：sylvatic（叢林），中等（大草原）和城市。
sylvatic（叢林）周期涉及在非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物和森林冠層中發(fā)現(xiàn)的蚊子之間傳播病毒。當(dāng)人類在職業(yè)或娛樂活動(dòng)中侵入?yún)擦謺r(shí)，病毒通過蚊子從黃熱病傳播到人類。
在非洲，一個(gè)中等（大草原）周期涉及從樹種繁殖的艾滋病菌傳播YFV。對(duì)于在叢林邊境地區(qū)生活或工作的人們。在這個(gè)周期中，病毒可以通過這些蚊子從黃熱病傳播到人類或從人類傳播到人類。
城市周期涉及病毒在人類和百日咳之間傳播，主要是艾滋病。伊蚊。
感染YFV的人體驗(yàn)到zui高水平的病毒血癥，并可以在發(fā)燒發(fā)生前不久和發(fā)病前3-5天將病毒傳播給蚊子。鑒于病毒血癥的高水平，血液傳播理論上可以通過輸血或針刺發(fā)生。一例發(fā)生野生型YFV的圍產(chǎn)期傳播已經(jīng)從一名在分娩前3天出現(xiàn)黃熱病的女性記錄下來(lái)。嬰兒對(duì)YFV RNA陽(yáng)性，在第12天死于暴發(fā)性黃熱病。
流行病學(xué)

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【市場(chǎng)部】    楊永漢

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Seven, treatment
The disease without special effects of drug treatment, mainly for symptomatic supportive care.
(A) general treatment.
Acute patients should be bed rest, local treatment, to prevent the spread of infection. The patient should be carefully nursing and symptomatic treatment.
(B) symptomatic treatment.
Nutritional support; rehydration, maintenance of water, electrolyte and acid-base balance; prevention and treatment of bleeding, hypotension shock; prevention and treatment of liver, renal failure and secondary infection and other complications.
Eight prognosis
Infection after the emergence of clinical symptoms accounted for about 5-20%, light infection can be self-healing, a small number of patients with serious illness to death. New immigrants into the epidemic area of ??the mortality rate of up to 30-40%. Rare sequelae.
Nine, prevention
(A) control the source of infection.
On the suspected and confirmed cases should be isolated treatment. Patients during viremia should be anti-mosquito isolation. We carry out hygiene and quarantine from personnel of yellow fever epidemic area.
(B) cut off the transmission.
Mosquito control is an important measure to prevent this disease.
(C) to protect the susceptible population.
Go to the yellow fever area staff should be vaccinated with yellow fever attenuated vaccine. In the yellow fever area should take personal anti-mosquito measures.
Yellow fever
Mark D. Gershman, J. Erin Staples
Infection agent
Yellow fever virus (YFV) is a single-stranded RNA virus belonging to the genus Flavors.
transmission
Infectious media spread through infected mosquitoes, mainly AIDS or sea eel bite occur. Nonhuman and human primates are the main reservoirs of the virus, along with the spread of humans (the spread between people). Yellow fever has three propagation cycles: sylvatic (jungle), medium (prairie) and city.
The sylvatic cycle involves the transmission of viruses between mosquitoes found in nonhuman primates and forest canopy. When humans invade the jungle in occupation or recreational activities, the virus spread from yellow fever to humans through mosquitoes.
In Africa, a medium (savannah) cycle involves the spread of YFV from the breeding of AIDS from the tree species. For people living or working in the jungle border area. In this cycle, the virus can spread from yellow fever to humans or from humans to humans through these mosquitoes.
The urban cycle involves the spread of the virus between humans and pertussis, mainly AIDS. Aedes mosquito
People who are infected with YFV experience the highest levels of viremia and can spread the virus to mosquitoes shortly before the onset of the fever and before the onset of the disease. Given the high levels of viremia, blood transmission can theoretically occur by transfusion or acupuncture. A perinatal transmission of wild-type YFV has been recorded from a woman who developed yellow fever 3 days before delivery. Infants were positive for YFV RNA and died of fulminant yellow fever on day 12.
Epidemiology