美國NovaBios 黃熱病酶免試劑 黃熱病酶聯免疫檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

黃熱病毒IgM、IgG、ELISA檢測試劑、黃熱病快速檢測試劑盒、

黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黃熱病檢測試劑盒

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios 黃熱病酶免試劑 黃熱病酶聯免疫檢測試劑盒

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖。可以從標準曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios

流行病學
黃熱病發生在撒哈拉以南非洲和熱帶南美洲，在那里它是流行性和間歇性流行的（見表3-22和3-23列出了有YFV傳播風險的國家）。大多數黃熱病是由于sylvatic或中間傳播周期。然而，城市黃熱病定期在非洲發生，而在美洲也是零星地發生的。在非洲地區，隨著YFV的持續流通，自然免疫隨著年齡的增長而積累，因此，嬰兒和兒童患疾病的風險zui高。在南美洲，在未經免疫的年輕男性中，通過在森林地區工作接觸蚊子載體的黃熱病zui常發生。
旅行者風險
旅行者獲得黃熱病的風險由各種因素決定，包括免疫狀況，旅行地點，季節，接觸時間，旅行時的職業和娛樂活動以及旅行時的當地病毒傳播率。盡管報告的人類疾病病例是疾病風險的主要指標，但病例報告可能不存在，因為傳播水平低，人群免疫力高（例如因為接種疫苗）或地方監視系統黃熱病敗檢測病例。這種“流行病學沉默”不等于沒有風險，不應該在不采取保護措施的情況下導致旅行。
西非農村的YFV傳播是季節性的，雨季結束和旱季開始（通常是7月至10月）的風險較高。然而，YFV可能由Ae偶然發送。即使在農村和密集的城市地區的干旱季節，埃及也是如此。
南美洲的感染風險在雨季（1月至5月，2月和3月發病高峰）zui高。鑒于感染人類可能發生的病毒血癥水平高，而且Ae廣泛分布。埃及在許多城市和城市，南美洲有大規模城市流行的風險。
從1970年到2015年，共有10例黃熱病患者來自美國和歐洲的未接種的旅行者，他們前往西非（5例）或南美洲（5例）。這10名旅客中有8人（80％）死亡。在接種疫苗的旅客中只有1例記錄了黃熱病。這種非致命的病例發生在西班牙，1988年訪問了幾個西非國家的旅行者。在2016年初，來自非洲和亞洲的15名長期旅行者在訪問了安哥拉之后，發生了黃熱病，這是zui大的城市暴發之一。據說，沒有一個生病的旅行者接種疫苗。
由于病毒傳播的生態決定因素的變化，難以預測獲得黃熱病的風險。在為期兩周的住宿期間，預計訪問流行地區的未接種疫苗的黃熱病可能導致疾病和死亡風險：
西非分別為每100,000人50人，10萬人10人
南美洲分別為每100,000人中5人，每10萬人1人

美國NovaBios

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【市場部】    楊永漢

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Epidemiology
Yellow fever occurs in sub-Saharan Africa and tropical South America, where it is epidemic and intermittent epidemic (see Table 3-22 and 3-23 lists countries with YFV risk). Most yellow fever is due to sylvatic or intermediate propagation cycles. However, urban yellow fever occurs regularly in Africa and occurs sporadically in the Americas. In the African region, with the continued flow of YFV, natural immunization accumulates with age, so infants and children have the highest risk of developing disease. In South America, yellow fever, which is exposed to mosquito vectors in the forest area, is the most common among young men without immunization.
Traveler risk
Travelers' risk of getting yellow fever is determined by a variety of factors including immune status, travel location, season, contact time, career and recreational activities during travel, and local viral transmission rates during travel. Although the reported case of human disease is a major indicator of disease risk, the case report may not exist because of low levels of transmission, high levels of human immunization (eg, vaccination) or local surveillance system. This "epidemiological silence" does not mean that there is no risk and should not lead to travel without resorting to protective measures.
YFV transmission in West African rural areas is seasonal, with a higher risk of the end of the rainy season and the beginning of the dry season (usually from July to October). However, YFV may be sent by Ae by chance. Even in rural and dense urban areas during the dry season, Egypt is also true.
Infection risk in South America was highest in the rainy season (peak months from January to May, February and March). In view of the high level of viremia that may occur in humans, Ae is widely distributed. Egypt in many cities and cities, South America has the risk of large-scale urban pop.
From 1970 to 2015, a total of 10 cases of yellow fever patients from the United States and Europe, unspecified travelers, they went to West Africa (5 cases) or South America (5 cases). Eight of the 10 passengers (80%) died. Only one case of vaccinated travelers recorded yellow fever. This non-fatal case occurred in Spain and in 1988 visited several travelers from West African countries. At the beginning of 2016, 15 long-term travelers from Africa and Asia, after visiting Angola, had a yellow fever, which was one of the largest urban outbreaks. It is said that no sick travelers were vaccinated.
Because of the ecological determinants of virus transmission, it is difficult to predict the risk of getting yellow fever. During the two-week stay, it is expected that access to epidemic areas of non-vaccinated yellow fever may lead to disease and death risk:
West Africa, respectively, for every 100,000 people 50 people, 10 million people 10 people
South America is 5 per 100,000 people, 1 per 100,000 people