美國NovaBios 黃熱病毒抗原ELISA檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

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黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黃熱病檢測試劑盒

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios 黃熱病毒抗原ELISA檢測試劑盒

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離?；虻确植㈤L期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖。可以從標準曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios

懷孕
黃熱病是黃熱病疫苗管理的預防措施。懷孕期間黃熱病疫苗接種的安全性尚未在大型前瞻性試驗中進行研究。然而，在懷孕早期接受黃熱病疫苗接種的婦女的研究發現，他們的嬰兒沒有發生重大畸形。注意到嬰兒輕微，多為皮膚畸形的風險略有增加。報告說，接種疫苗的孕婦自發黃熱病率較高，但在隨后的研究中沒有得到證實。根據研究（39％或98％），開發YFV特異性IgG抗體的孕婦接種疫苗的比例是不同的，可能與接種疫苗的三個月相關。因為懷孕可能會影響免疫功能，所以可以考慮血清學檢測來記錄疫苗的保護性免疫反應。
如果旅行是不可避免的，并且感染疫苗的風險超過YFV暴露的風險，孕婦應免除免疫接種，并頒布醫療豁免以履行衛生規定。必須前往接觸YFV的地區的孕婦應接種疫苗。雖然沒有具體數據，但ACIP建議女性在懷孕前接受黃熱病疫苗后等待4周。
哺乳
母乳喂養是黃熱病疫苗管理的預防措施。在母親接受黃熱病疫苗接種的*母乳喂養的嬰兒中，已報告了三例YEL-AND病例。所有3名嬰兒在接觸時被診斷患有腦炎并且年齡<1個月。需要進一步的研究來記錄通過母乳喂養潛在疫苗接種的風險。直到有更多的信息，母乳喂養婦女應避免黃熱病疫苗。但是，如果不能避免或推遲養育母親到黃熱病地區的旅行，那么這些婦女應該接種疫苗。
其他考慮因素
對于其他慢性疾病（如腎臟疾病，丙型肝炎病毒感染，其他肝臟疾病或糖尿?。┑幕颊呓o予黃熱病疫苗后，沒有關于可能增加的不良事件或疫苗效力降低的數據。如果考慮接種這類患者，應謹慎使用。評估患者一般免疫能力水平的因素包括疾病嚴重程度，持續時間，臨床穩定性，并發癥和合并癥。
其他疫苗和藥物的同時管理
沒有證據表明滅活的疫苗會干擾對黃熱病疫苗的免疫應答。因此，滅活疫苗可以同時或在黃熱病疫苗接種之前或之后的任何時間施用。 ACIP建議與其他活病毒疫苗同時給予黃熱病疫苗。否則，臨床醫生應該在接種疫苗之前等待30天，因為如果在另一次活病毒疫苗的30天內給藥，對活的病毒疫苗的免疫應答可能會受損。一項關于在兒童中同時施用黃熱病和麻疹 - 腮腺炎 - 風疹（MMR）疫苗的研究發現，在同一天給予疫苗，而間隔30天時，對黃熱病，腮腺炎和風疹的免疫應答降低。需要進一步的研究來確認這些發現，但是他們建議如果可能的話，黃熱病和MMR應相隔30天。有限的數據表明，口服Ty21a傷寒疫苗，一種活細菌疫苗，可以在黃熱病疫苗之前或之后同時或以任何間隔進行施用。沒有關于同時給予減毒流感和黃熱病疫苗的免疫反應的數據。然而，減毒流感和MMR的數據沒有發現干擾的證據。

美國NovaBios

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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【市場部】    楊永漢

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quirements and recommendations for specific countries are available on the CDC Travelers’ Health page.
Serious adverse events can occur following yellow fever vaccination. Therefore, persons should only be vaccinated if they are at risk of exposure to yellow fever virus or require proof of vaccination for country entry.
To minimize the risk of serious adverse events, healthcare providers should carefully observe the contraindications and consider the precautions about vaccination prior to vaccine administration (see below). A medical waiver can be given for persons with a precaution about or contraindication to vaccination. More information about medical waivers is available on the CDC Travelers’ Health website.
For more information about the use of yellow fever vaccine in travelers or laboratory workers, see the Advisory Committee on Immunization Practice (ACIP) recommendations.
This vaccine is administered only at designated vaccination centers. Locations of centers are available from local health departments or at the CDC Travelers’ Health Yellow Fever website. For healthcare professionals who want to learn more about yellow fever disease and vaccine, a continuing education module is available.
Booster doses of the vaccine
In February 2015, the CDC Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP) approved a new recommendation that a single dose of yellow fever vaccine provides long-lasting protection and is adequate for most travelers. The updated recommendations also identify specific groups of travelers who should receive additional doses and others for whom additional doses may be considered including:
Woman who were pregnant when first vaccinated
Persons who received a hematopoietic stem cell transplant following their last dose of yellow fever vaccine
Persons who are HIV-infected
Travelers who received yellow fever vaccine at least 10 years previously and who will be in a higher-risk setting based on season, location, activities, and duration of their travel
Laboratory workers who routinely handle wild-type yellow fever virus
The official ACIP recommendations were published on June 19, 2015 (see Advisory Committee on Immunization Practice (ACIP) recommendations. All current ACIP yellow fever vaccine recommendations can be found on the ACIP website.