美國NovaBios黃熱病毒酶聯免疫試劑（ELISA間接法）

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業供應各種進口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學。歡迎咨詢

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黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黃熱病檢測試劑盒

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios黃熱病毒酶聯免疫試劑（ELISA間接法）

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數情況下，癥狀包括發熱，寒戰，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內改善。在一些人在一天內改善，發燒回來，腹痛發生，肝損傷開始導致黃色皮膚。如果發生這種情況，出血和腎臟問題的風險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現HRP酶反應。TMB由HRP催化以產生在加入酸性停止溶液后變為黃色的藍色產物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產品規格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產品應用：用于定性檢測人血清，血漿，細胞培養上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養箱
2.酶標儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環。
細胞培養上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細胞懸浮液進行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標準曲線。
1.在預涂板上分別設置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設定的孔中。
3.向對照（零）孔中加入50μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側壁。搖動平板以混合內容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應立即變為黃色。
13.閱讀O.D.在微板讀數器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標準曲線可以作為每種標準溶液（Y）的相對O.D.450與標準溶液（X）的相應濃度作圖?？梢詮臉藴是€插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數乘以內插法得到稀釋前的濃度。

C.結果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負控制的平均值+0.15
3.陰性結果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分數分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結晶并分離。如果發生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

美國NovaBios

對于孕婦來說，黃熱病疫苗接種尚未知道會導致任何出生缺陷。許多孕婦已經接受了黃熱病疫苗，對胎兒沒有任何明顯的不良影響。然而，由于黃熱病疫苗是一種活病毒疫苗，它構成了理論風險。雖然黃熱病疫苗接種和受孕兩周的延誤可能是足夠的，但延遲一個月被提倡作為更保守的做法。如果一個女人在懷孕期間無意中或必須接種疫苗，她不太可能出現疫苗問題，而她的寶寶很有可能出生健康。
黃熱病疫苗是一種活的減毒病毒疫苗，自20世紀30年代以來一直可用。沒有用黃熱疫苗進行疫苗療效研究。然而，在引入支持其在人體中保護的疫苗之后，黃熱病病例的數量大大減少。
黃熱病疫苗建議
對于南美洲和非洲黃熱病病毒傳播危險地區的旅客或生活在9歲以上的人士，建議使用黃熱病疫苗。可能需要黃熱病疫苗進入某些國家。有關特定國家的黃熱病疫苗接種要求和建議，請參見“CDC旅行者健康”頁面。
嚴重的不良事件可能發生在黃熱病疫苗接種后。因此，如果有風險接觸黃熱病病毒或要求國家進入疫苗接種證明，那么只能接種人員。
為了盡量減少嚴重不良事件的風險，醫務人員應仔細觀察禁忌癥，并考慮疫苗接種前的注意事項（見下文）。對預防接種疫苗或禁忌癥的人員可以給予醫療豁免。有關醫療豁免的更多信息，請訪問CDC旅行者健康。
有關在旅行者或實驗室工作人員使用黃熱病疫苗的更多信息，請參閱免疫實踐咨詢委員會（ACIP）的建議。
該疫苗僅在的疫苗接種中心進行。中心的地點可從當地衛生部門或CDC旅行者健康黃熱病獲取。對于想要了解更多關于黃熱病和疫苗的醫療保健專業人員，可以獲得繼續教育模塊。
加強劑量的疫苗
2015年2月，CDC免疫實踐咨詢委員會（ACIP）批準了一項新建議，即單劑量的黃熱病疫苗提供長期的保護，適合大多數旅客。更新的建議還確定了應該接受額外劑量的特定旅客群體，另外可以考慮增加其他劑量的旅行者，包括：
*次接種疫苗時懷孕的女人
在zui后一劑黃熱病疫苗后接受造血干細胞移植的人
艾滋病毒感染者
至少10年前接受黃熱病疫苗的旅客，根據季節，地點，活動和旅行時間，將處于較高風險的環境中

美國NovaBios

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

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For pregnant women, yellow fever vaccination is not known to cause any birth defects. Many pregnant women have received a yellow fever vaccine, the fetus without any significant adverse effects. However, since the yellow fever vaccine is a live virus vaccine, it constitutes a theoretical risk. Although yellow fever vaccination and conception of two weeks of delay may be sufficient, but delayed one month was promoted as a more conservative approach. If a woman is inadvertently or has to be vaccinated during pregnancy, she is unlikely to have a vaccine problem, and her baby is likely to be born healthy.
The yellow fever vaccine is a live attenuated virus vaccine that has been available since the 1930s. No use of yellow fever vaccine for vaccine efficacy study. However, after introducing vaccines that support its protection in the human body, the number of cases of yellow fever is greatly reduced.
Yellow fever vaccine recommendations
North American and African yellow fever virus transmission area of ??the passengers or living in the age of 9 or older people, the proposed use of yellow fever vaccine. May need yellow fever vaccine into some countries. Please refer to the CDC Traveler Health page for specific country requirements for yellow fever vaccination.
Serious adverse events may occur after a yellow fever vaccine. Therefore, if there is a risk of contact with yellow fever virus or require the country to enter the vaccination certificate, then only vaccination.
In order to minimize the risk of serious adverse events, the medical staff should carefully observe the contraindications and consider the precautions before vaccination (see below). A medical exemption may be granted to persons vaccinated or contraindicated. For more information on medical exemption, please visit the CDC Traveler Health website.
For more information on the use of yellow fever vaccines for travelers or lab staff, please refer to the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP).
The vaccine is only carried out at the designated vaccination center. The location of the center can be obtained from the local health department or CDC Traveler's Healthy Yellow Fever website. For health care professionals who want to learn more about yellow fever and vaccines, you can get a continuing education module.
Boost the dose of the vaccine
In February 2015, the CDC Immunization Practice Advisory Committee (ACIP) approved a new proposal that a single dose of yellow fever vaccine provides long-term protection for most travelers. The updated recommendations also identify specific passenger groups that should receive additional doses, and may consider increasing the number of other travelers, including:
The first time the vaccine is pregnant
Patients who receive hematopoietic stem cell transplantation after the last dose of yellow fever vaccine
People living with HIV
Passengers who have received a yellow fever vaccine at least 10 years ago will be in a high-risk environment based on season, location, activity and travel time