美國NovaBios黃熱病（YFV-IgG/IgM）抗體檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌黃熱病檢測試劑盒，包括美國的NovaBios、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

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黃熱病毒核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲安哥拉工作、旅游黃熱病檢測試劑盒

美國CDC的黃熱病毒診斷試劑——美國的NovaBios

美國NovaBios 黃熱病（YFV-IgG/IgM）抗體檢測試劑盒

【黃熱病簡介】
黃熱病，歷*稱為黃色杰克，黃色瘟疫或青銅約翰，是一種急性病毒性疾病。在大多數(shù)情況下，癥狀包括發(fā)熱，寒戰(zhàn)，食欲不振，特別是在背部的肌肉痛，和頭痛。癥狀通常在五天內(nèi)改善。在一些人在一天內(nèi)改善，發(fā)燒回來，腹痛發(fā)生，肝損傷開始導(dǎo)致黃色皮膚。如果發(fā)生這種情況，出血和腎臟問題的風(fēng)險也增加。

【檢測原理】
96孔板YFV-IgM/IgG特異性抗原。將對照或測試樣品加入到合適的孔中并孵育。用洗滌緩沖液洗去游離組分。將HRP綴合的檢測試劑加入到孔中。TMB底物用于顯現(xiàn)HRP酶反應(yīng)。TMB由HRP催化以產(chǎn)生在加入酸性停止溶液后變?yōu)辄S色的藍(lán)色產(chǎn)物。黃色的密度與板中捕獲的樣品的YFV-IgM/IgG量成比例。外徑在微板讀數(shù)器中在450nm下通過分光亮度計測量吸亮度，然后可以計算YFV-IgM/IgG的濃度。

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒
檢測范圍：定性
靈敏度：定性
儲存和使用期：2-8℃ 儲存12個月
產(chǎn)品應(yīng)用：用于定性檢測人血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液或任何生物液體中的YFV-IgM。

【套件組件】
1.一個96孔板預(yù)涂
2.陽性對照：0.5ml
3.陰性對照：0.5ml
4.洗滌緩沖液（30×）：20 ml。稀釋：1:30
5.樣品稀釋緩沖液：6ml
6.6HRP酶聯(lián)試劑（RTU）：6ml
7.終止液：6ml
8.TMB底物：6ml
9.TMB底物B：6ml
10.板密封：2
11.密封袋：1

【需要材料但不提供】
1.37℃培養(yǎng)箱
2.酶標(biāo)儀（波長：450nm）
3.精確的移液器和一次性移液器吸頭
4.自動洗板機
5.ELISA振蕩器
1.5ml管
7.板蓋
8.吸收濾紙
9.100ml和1L體積量筒。

【操作程序】
A.制備樣品和試劑
1. 樣品
收集并立即分析測試樣品（2小時內(nèi)）后立即分離。或等分并長期儲存在-20°C。避免多個凍融循環(huán)。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：以約2000-3000×rpm離心20分鐘，以去除沉淀，立即分析或分裝，并儲存于-20℃。
血清：在室溫下凝結(jié)血清（約4小時）。以約2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析血清或等分，并儲存在-20°C。
血漿：用檸檬酸鹽或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi)以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
尿：在無菌容器中收集，以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即分析或等分，并存儲在-20°C冷凍。
組織：組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。收集和沖洗樣品在2-4℃下用PBS（Ph 7.4）。稱重樣品并用PBS（Ph 7.4）勻化，并對細(xì)胞懸浮液進(jìn)行超聲處理。以2000-3000×rpm離心20分鐘。立即測定或等分并儲存在-80℃。
（注意：1.*凝結(jié)血液樣品，離心，避免溶血和沈淀。   2.NaN3不能用作試驗樣品防腐劑，因為它抑制HRP。）

2.洗滌緩沖液
用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液30倍（1/30）（即將20ml濃縮洗滌緩沖液加入580ml蒸餾水中）。

B.測定程序
在使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫。建議繪制每個測試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.在預(yù)涂板上分別設(shè)置陽性/陰性，測試樣品和對照（零）孔，并記錄它們的位置。
2.將50μl的陰性和陽性對照等分到設(shè)定的孔中。
3.向?qū)φ眨悖┛字屑尤?0μl樣品稀釋緩沖液。
4.向測試樣品孔中加入50μl適當(dāng)稀釋的樣品（樣品稀釋比例：1：5）。在底部加入溶液而不接觸側(cè)壁。搖動平板以混合內(nèi)容物。
5.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
6.取下蓋子并通過在吸收性濾紙或其他吸收材料上敲擊板來丟棄板內(nèi)容物。
7.棄去溶液，用洗滌緩沖液洗滌板5次。不要讓孔在任何時候*干燥。
手動清洗：丟棄溶液，不要接觸側(cè)壁。將吸水濾紙或其他吸收材料上拍出液體。將洗滌緩沖液填滿每個孔，并在ELISA振蕩器上輕輕渦流2 分鐘。丟棄內(nèi)容物，并將吸收性濾紙或其他吸收材料上的板敲打。洗板五次。
自動洗滌：棄去所有孔中的溶液，并用洗滌緩沖液洗滌板5次（用緩沖液過量填滿孔）。在zui后的洗滌之后，翻轉(zhuǎn)該板并敲擊吸收性濾紙或其它吸收材料。建議將清洗器設(shè)置為1分鐘的浸泡時間。
8.向每個孔中加入50μlHRP結(jié)合物的試劑（對照孔除外）。在每個孔底部加入溶液，不要接觸側(cè)壁。
9.用蓋子密封板，并在37℃孵育30分鐘。
10.取下蓋子，用洗滌緩沖液洗板5次。
11.向每個孔中加入50μlTMB底物A和50μlTMB底物B，蓋上平板并在37℃下孵育15分鐘。避免暴露于光。
12.向每個孔中加入50μl終止液，充分混勻。顏色應(yīng)立即變?yōu)辄S色。
13.閱讀O.D.在微板讀數(shù)器中在450nm的吸亮度在加入終止溶液的15分鐘內(nèi)。對于計算，（相對O.D.450）=（每個孔的O.D.450） - （零阱的O.D.450）。標(biāo)準(zhǔn)曲線可以作為每種標(biāo)準(zhǔn)溶液（Y）的相對O.D.450與標(biāo)準(zhǔn)溶液（X）的相應(yīng)濃度作圖。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線插入樣品的人類YFV-IgM濃度。
14.注意：如果稀釋樣品，稀釋倍數(shù)乘以內(nèi)插法得到稀釋前的濃度。

C.結(jié)果確定
1.試驗有效性：陽性對照的平均值≥1.00; 陰性對照的平均值≤0.10。
2.臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=負(fù)控制的平均值+0.15
3.陰性結(jié)果：如果OD值<CUT OFF，樣品為人YFV-IgM陰性。
4.陽性結(jié)果：如果OD值≥CUTOFF，樣品為人類YFV-IgM陽性。

D.注意事項
1.在實驗之前，離心每個試劑盒組分?jǐn)?shù)分鐘，將所有試劑倒入試管底部。
2.在混合或重新組裝部件時避免起泡或氣泡。
3.洗滌緩沖液可結(jié)晶并分離。如果發(fā)生這種情況，請加熱管以溶解。
4.建議每個對照和樣品一式兩份或重復(fù)測量三次。
5.不要讓板在任何時候*干燥！這可以使板上的生物材料失活。
6.不要重復(fù)使用移液器吸頭和管，以避免交叉污染。
7.不要使用不同套件中過期的組件或組件。
8.將TMB底物B儲存在黑暗中，并且為了避免板溫育對于溫度差的邊緣效應(yīng)，建議在使用前在室溫下使TMB底物平衡30分鐘。用滅菌的吸頭抽吸所需的劑量，不要將殘留溶液倒回到小瓶中。

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黃熱病
自2006年版CDC Health Information for International Travel發(fā)布以來，已經(jīng)提供了關(guān)于黃熱病毒（YFV）傳播的地理風(fēng)險的其他國家數(shù)據(jù)。根據(jù)世衛(wèi)組織地理黃熱病風(fēng)險測繪科學(xué)和技術(shù)咨詢小組（CDC參與）對這些數(shù)據(jù)的審查，為盧旺達(dá)提供了更新的黃熱病疫苗接種建議。
某些國家以前需要按十年的時間間隔對黃熱病進(jìn)行滅活，以遵守衛(wèi)生條例（IHR）。 2014年，衛(wèi)生組織世界衛(wèi)生大會通過了關(guān)于修改“衛(wèi)生條例”的建議，取消了10年加藥劑量要求，并規(guī)定了這一變化的2年過渡期。因此，截至2016年7月11日，完成的疫苗接種或預(yù)防證書（ICVP）在接種者的一生中是有效的。此外，即使zui后一次疫苗接種超過十年，各國也不能要求證明再次接種（加強）抗黃熱病作為進(jìn)入條件。
在美國，免疫規(guī)范咨詢委員會（ACIP）在2015年發(fā)布了一項新建議，一劑黃熱病疫苗提供持久的保護(hù)，對大多數(shù)旅客來說是足夠的。該建議還確定了應(yīng)該接受額外劑量的特定旅客群體，另外還可以考慮其他劑量的旅行者。有關(guān)詳細(xì)信息，請參閱本章前面的“黃熱病”部分。有關(guān)黃熱病疫苗增強劑的信息，請參閱CDC旅行者健康或ACIP上發(fā)布的具體出版物。
zui終，臨床醫(yī)生決定是否接種任何旅客必須考慮到旅行者感染YFV的風(fēng)險，國家入境要求以及黃熱病接種后（如年齡和免疫狀態(tài)）嚴(yán)重不良事件的個別危險因素。有關(guān)黃熱病和疫苗接種指導(dǎo)的詳細(xì)討論，請參閱本章前面的“黃熱病”部分。
注意：盡管近期有關(guān)黃熱病疫苗增強劑的“衛(wèi)生條例”發(fā)生了變化，但是當(dāng)所有有黃熱病疫苗接種入境要求的國家何時以及是否會采用這一改變是不確定的。即使各國修改*政策，將ICVP的有效期從10年延長到黃熱病的一生，不能保證所有國家邊界官員都會意識到這種政策變化或者能夠適當(dāng)執(zhí)行。 CDC從世衛(wèi)組織每年獲得關(guān)于*國家入境要求的信息。世衛(wèi)組織可能不會在每年的調(diào)查問卷中詢問有關(guān)黃熱病疫苗加藥入門要求的國家，因為假定各國遵守經(jīng)修訂的“衛(wèi)生條例”。這可能在可預(yù)見的未來留下準(zhǔn)確公布的關(guān)于某些國家黃熱病疫苗增強劑入門要求的信息。過去的經(jīng)驗表明，領(lǐng)事館和大黃熱病關(guān)于疫苗接種要求的資料往往不準(zhǔn)確。因此，提供者和旅行者在確定特定目的地目前的黃熱病疫苗接種入境要求時，不應(yīng)僅僅依靠這些信息。根據(jù)上述注意事項，讀者應(yīng)參考本書在線版本和CDC旅行者健康，以了解有關(guān)國家入境要求的任何報告更新出版本版。

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我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Yellow fever
Since the release of the 2006 CDC Health Information for International Travel, other national data on the geographical risk of yellow fever (YFV) transmission have been provided. According to the WHO Geographic Yellow Fever Risk Mapping Science and Technology Advisory Group (CDC Participation), the review of these data provided Rwanda with updated recommendations for yellow fever vaccination.
Some countries previously had to inactivate yellow fever at a ten-year interval to comply with the International Health Regulations (IHR). In 2014, the WHO World Health Assembly adopted a proposal to amend the International Health Regulations to abolish the 10-year dose requirement and set a two-year transition period for this change. Thus, as of July 11, 2016, the completion of the International Vaccination or Prevention Certificate (ICVP) was effective in the lifetime of the inoculum. In addition, even if the last vaccination for more than a decade, countries can not claim to re-vaccination (strengthening) anti-yellow fever as access conditions.
In the United States, the Advisory Committee on Immunization (ACIP) issued a new proposal in 2015, a long-term protection of yellow fever vaccine, which is sufficient for most travelers. The proposal also identifies specific passenger groups that should receive additional doses, as well as other doses of travelers. For more information, see the "Yellow Fever" section earlier in this chapter. For the latest information on the yellow fever vaccine enhancer, please refer to the CDC Traveler Health website or the specific publication published on the ACIP website.
In the end, the clinician decides whether or not to receive any passenger must take into account the risk of travelers' infection with YFV, national entry requirements, and individual risk factors for serious adverse events such as age and immune status after inoculation with yellow fever. For a detailed discussion of yellow fever and vaccination guidelines, see the "Yellow Fever" section earlier in this chapter.
Note: Although the recent changes in the International Health Regulations on fever agents for yellow fever have changed, it is uncertain whether and when all countries with yellow fever vaccination requirements are imported. Even if countries modify their official policies, extending ICVP's ??validity from 10 years to yellow fever will not guarantee that all state borders officials will be aware of such policy changes or be able to implement them appropriay. The CDC obtains information on official country entry requirements each year from WHO. WHO may not ask in the annual questionnaire about countries that require entry requirements for yellow fever vaccine dosing because it is assumed that States comply with the revised International Health Regulations. This may leave an accurate information on the requirements for entry requirements for some countries with yellow fever vaccine enhancers in the foreseeable future. Past experience has shown that consulates and rhubarb fever are often inaccurate for information on vaccination requirements. Therefore, providers and travelers should not rely solely on this information when determining the current requirement for vaccination of yellow fever in a particular destination. In accordance with the above precautions, the reader should refer to the online version of this book and the CDC Traveler Health website to learn about any national renewal requirements.