新品ELISA試劑盒實驗標準曲線平直試驗原理：
PAI-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知PAI-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PAI-1和*標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中PAI-1的濃度呈比例關系。
操作注意事項
1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
新品ELISA試劑盒實驗標準曲線平直標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA試劑盒中可使本底加深。
◆凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混合，不要在混勻器上強烈震蕩。
◆渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
◆反復凍融會使蛋白效價降低，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。ELISA試劑盒
一般有以下原因：標準曲線制備是否不當，洗孔不凈，吸孔不充分，讀數不準確或是吸量誤差。查找原因，即可找到相應解決方案。
新品ELISA試劑盒實驗標準曲線平直結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的PAI-1標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的PAI-1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-80ng/ml
4、敏感度： 0.1 ng/ml
