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技術文章

多克隆抗體的制備方法

閱讀：416發布時間：2015-7-15

一、器材

ELISA試劑盒剪刀（剪兔毛用）一把、彎頭眼科*子（游離血管用）一把、直頭眼科*（剪血管用）一把，*架，*片，注射器（1ml、10ml，25ml）附針頭，兔子固定架，滅菌三角燒瓶（200ml）或平皿（直徑18cm）、彎頭*四把，直頭*兩把，手術縫合線，塑料放血管，紗布等。

二、試劑

生理鹽水

弗氏*佐劑（Freund’s complete adjuvant， FCA）

弗氏不*佐劑（Freund’s incomplete adjuvant， FIA）

二甲苯，酒精棉，脫脂棉，2% NaN3

三、ELISA試劑盒免疫原：蛋白或KLH偶聯的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。

四、兔子的選擇

兔子的重量應在四斤以上，兩耳光滑，明顯可見耳靜、動脈，健康。

五、免疫

ELISA試劑盒用生理鹽水稀釋免疫原，然后與相應的佐劑進行1:1混合。抗原和佐劑*混合形成穩定的乳劑，將該乳劑在兔子雙肩周圍的皮膚下進行皮下注射和后大腿進行肌肉注射。每個區域大約用1/4的免疫原。這樣免疫原可以持久存在從而提高免疫應答。


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